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第一部分Aurora A反义寡核苷酸对人肺腺癌细胞A549细胞生长与细胞周期的影响背景:Aurora A激酶是进化上保守的有丝分裂丝/苏氨酸激酶Aurora激酶家族成员之一,已在肺腺癌细胞A549中检测到Aurora A的高表达,并发现其高表达与肺癌的发生、染色体不稳以及低分化密切相关。目的:探讨下调Aurora A基因表达对肺癌细胞生长和细胞周期分布的影响。方法:用脂质体瞬时转染法介导Aurora A反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)处理肺腺癌细胞A549,RT-PCR及western-blot方法检测Aurora A mRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期分布的变化,四唑氮蓝法(MTT)检测转染前后细胞生长抑制率的变化。结果:Aurora A反义寡核苷酸作用于A549细胞后,细胞的生长抑制率呈剂量和时间依赖性,其中48h的IC50值约为300 nmol/L,在此浓度和时间下,Aurora A反义寡核苷酸可明显降低Aurora A mRNA和蛋白的表达,且细胞周期阻滞于G2/M期和S期。结论:下调Aurora A表达可抑制肺腺癌细胞A549的增殖同时导致细胞阻滞于G2/M期及S期。第二部分Aurora A反义寡核苷酸联用紫杉醇对体外肺腺癌细胞A549生长的抑制作用背景:紫杉醇是治疗肺癌的第三代植物碱类化疗药物,其作用于微管系统以导致细胞在有丝分裂时不能形成纺锤体和纺锤丝;同时Aurora A与微管纺锤体的装配及稳定性密切相关;理论上两者具有共同的作用路径。目的:探讨在体外培养的肺癌细胞A549中, Aurora A反义寡核苷酸对紫杉醇化疗敏感性的影响,并分析其内在机制。方法:用脂质体瞬时转染法介导Aurora A反义寡核苷酸(antisense oligodeoxyneucleotides,ASODN)处理肺腺癌A549细胞6h后,给予一定浓度的紫杉醇(PTX)继续作用24h,用四唑氮蓝法(MTT)观察各组的量效反应,并计算半数抑制浓度IC50的值。结果:Aurora A ASODN转染增加了肺癌细胞A549对紫杉醇的敏感性,ASODN +紫杉醇组的细胞生长抑制率在30h达(70.51±1.77)%,明显高于单用ASODN的(29.98±2.05)%(P<0.05)和紫杉醇的(33.61±1.57)% (P<0.05)。结论:Aurora A ASODN增强肺腺癌细胞A549对紫杉醇的化疗敏感性,该作用可能与Aurora A ASODN使细胞发生G2/M期阻滞有关。