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目的:肺癌作为当前高发恶性肿瘤,是导致全球癌症死亡病例的首要原因,其中非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)占肺癌总数的75%-80%。由于早期肺癌症状隐匿及不典型,多数患者诊断时已处于晚期,靶向治疗通过作用于特异性位点专一性杀伤肿瘤细胞,较过去放化疗有效改善了患者的生存率,且副反应较低。成纤维细胞生长因子1(fibroblast growth factor1,FGF1)是FGF家族成员之一,相关研究发现FGF1高表达与NSCLC原发病灶大小及血管侵袭性相关,且高表达FGF1患者总体生存率下降,但具体分子机制尚不清楚。本研究拟从细胞水平,研究应用小干扰RNA(small interference RNA,si RNA)沉默FGF1基因表达对肺癌A549细胞侵袭性的影响及可能的分子机制。方法:1、设计并合成带有荧光标签的FGF1的特异性si RNA即si RNA-1,si RNA-2、si RNA-3和空载体(NC-si RNA),将细胞分为5组:si RNA-1组,si RNA-2组,si RNA-3组,NC-si RNA组,对照组,分别转染5组细胞。转染48小时后,通过Western Blot技术分别检测5组A549细胞中FGF1蛋白表达量。选取降低最明显的si RNA-1作为后续实验的工具。2、后续实验将A549细胞分为3个实验组(对照组,NC-si RNA组,si RNA-1组),分别提取RNA、蛋白质,通过q RT-PCR和Western Blot技术分别检测3组细胞MMP-9、E-钙粘蛋白、N钙粘蛋白的m RNA及蛋白表达水平变化。3、应用流式细胞术测定3组细胞线粒体膜电位变化。4、应用Transwell实验测定3组细胞侵袭能力。结果:1、si RNA沉默肺癌A549细胞FGF1基因48小时后,si RNA-1、si RNA-2组细胞FGF1蛋白表达水平与对照组相比显著降低(P<0.001,P<0.01,n=6),si RNA-3、NC-si RNA组细胞与对照组相比,FGF1蛋白表达水平无显著变化(P>0.05,n=6)。2、si RNA-1组细胞与对照组相比,MMP-9蛋白及m RNA表达水平明显降低(P<0.001,n=6),E-钙粘蛋白在蛋白及m RNA表达水平明显升高(P<0.001,n=6),N-钙粘蛋白在蛋白及m RNA表达水平未见明显差异(P>0.05,n=6);NC-si RNA组细胞与对照组相比,MMP-9、E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白在蛋白及m RNA表达水平均无明显差异(P>0.05,n=6)。3、应用流式细胞术观察到,与对照组相比,si RNA-1组细胞线粒体膜电位显著降低(P<0.001,n=6),表明细胞凋亡比例升高;NC-si RNA组细胞线粒体膜电位较对照组未见明显差异(P>0.05,n=6)。4、应用Transwell实验检测各细胞组侵袭性变化,si RNA-1组细胞与对照组相比,进入下层小室细胞数目明显减少(P<0.001,n=6),反映细胞的侵袭能力下降;而NC-si RNA组较对照组未见明显变化(P>0.05,n=6)。结论:在NSCLC细胞中,采用si RNA特异性沉默FGF1基因后,FGF1蛋白表达降低,引起MMP-9表达下降,E-钙粘蛋白表达升高,细胞凋亡比例升高,最终降低肺癌A549细胞的侵袭能力,提示FGF1可作为未来NSCLC治疗的潜在靶标。