组织工程支架应该模拟天然细胞外基质的结构与成分,以便为细胞的生长提供理想的环境。天然细胞外基质主要由纳米级的丝状胶原蛋白和粘多糖构成,利用天然蛋白和多糖构建的复合纳米纤维支架可在一定程度上模拟这种结构。作为天然材料的壳聚糖和丝素(SF)以其来源广泛且具有优良的生物相容性,是制备组织工程支架的优选材料。研究表明,肝细胞表面含有甘草次酸受体和唾液酸糖蛋白受体,可特异性识别半乳糖和甘草次酸并与之产生相互作用。许多研究证实肝细胞在含有半乳糖的材料上表现出更好的黏附与增殖行为,利用甘草次酸和半乳糖接枝改性的壳聚糖纳米粒子也被报道具有肝细胞靶向特异性。本研究采用绿色电纺技术构建肝细胞靶向性壳聚糖/SF复合纳米纤维支架,并对其进行系列理化表征和初步的肝细胞相容性评价。主要研究内容和结果如下:1)肝细胞靶向性壳聚糖的制备与表征。以壳聚糖、乳糖酸和甘草次酸为原料,使用酰胺化反应机理,在EDC和NHS的交联作用下成功合成3种肝细胞靶向性壳聚糖:甘草次酸壳聚糖(GC)、半乳糖壳聚糖(LC)以及半乳糖/甘草次酸双修饰壳聚糖(GLC),元素分析表明壳聚糖上半乳糖的接枝率远高于甘草次酸;2)肝细胞靶向性壳聚糖/SF复合纳米纤维支架的制备与表征。通过绿色静电纺丝技术,制备肝细胞靶向性壳聚糖/SF复合纳米纤维,所得纤维光滑均匀,平均直径约400nm,随着改性壳聚糖的加入材料结晶度有所增加,而材料的热稳定性和亲水性均有所降低;3)体外细胞毒性及肝细胞相容性检测证明上述复合纳米纤维支架具有良好的细胞相容性,均能显著促进HepG2细胞增殖及其功能蛋白(尿素、白蛋白)的表达,其中含半乳糖基的支架优于含甘草次酸的支架,且二者无协同效应,提示半乳糖基是构建肝组织工程支架较为理想的选项。本研究为构建肝组织工程支架进行了有益探索。