【摘 要】
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目的:研究血清同型半胱氨酸水平与LncRNA ANRIL的相关性及对人脐静脉内皮细胞表达白介素-10(IL-10)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法:实验一:(1)体外培养人脐静脉内皮细胞;给予不同浓度梯度(空白对照组、0.5mmol/L、1.0mmol/L、2.0 mmol/L、5.0 mmol/L)同型半胱氨酸(Hcy)处理细胞。(2)用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PC
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目的:研究血清同型半胱氨酸水平与LncRNA ANRIL的相关性及对人脐静脉内皮细胞表达白介素-10(IL-10)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法:实验一:(1)体外培养人脐静脉内皮细胞;给予不同浓度梯度(空白对照组、0.5mmol/L、1.0mmol/L、2.0 mmol/L、5.0 mmol/L)同型半胱氨酸(Hcy)处理细胞。(2)用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)检测LncRNA ANRIL表达水平。(3)酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测MCP-1及IL-10含量水平。实验二:(1)体外培养人脐静脉内皮细胞,用Lipo Fiter转染试剂分别将shANRIL、shNC转染入不同细胞内。再选取实验一最佳Hcy浓度干预24h进行实验。(2)蛋白免疫印迹(Western blot)检测MCP-1及IL-10的蛋白表达水平。结果:(1)与空白对照组相比,Hcy干预组LncRNA ANRIL、MCP-1表达量增加,IL-10表达量降低(P<0.05)。(2)各组间相比较,结果是随Hcy浓度增加,IL-10表达量降低,LncRNA ANRIL、MCP-1表达量升高(P<0.05)。(3)与空白对照组相比,Hcy组、shNC+Hcy组、shANRIL+Hcy组IL-10蛋白表达量较低、MCP-1蛋白表达量较高(P<0.05)。(4)与shANRIL+Hcy组相比,Hcy组、shNC+Hcy组IL-10蛋白表达量较低、MCP-1蛋白表达量较高(P<0.05)。(5)shNC+Hcy组及Hcy组间IL-10蛋白、MCP-1蛋白表达量无明显差异(P>0.05)。结论:(1)Hcy通过促进LncRNA ANRIL表达,共同参与动脉粥样硬化(AS)。(2)Hcy通过抑制IL-10分泌、促进MCP-1分泌,参与炎症反应过程,导致动脉粥样硬化(AS)发生。(3)沉默LncRNA ANRIL,可使IL-10表达增加、MCP-1表达减少。(4)Hcy通过促进LncRNA ANRIL表达,使MCP-1表达上调、IL-10表达下调,从而促进细胞炎症反应,参与动脉粥样硬化。
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