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目的:
1.建立尿素酶前处理尿液气相色谱-质谱联用仪(Gaschromatography-Massspectrometry，GC-MS)分析方法。
2.比较半乳糖血症患儿治疗前后尿中代谢产物与正常健康儿童、酪氨酸血症患儿及病毒性肝炎患儿的差别，建立半乳糖血症的尿GC-MS诊断方法。
方法:
1.留取已明确诊断的5例多种羧化酶缺乏症和30例正常健康儿童尿液作为实验敏感性测试标本。
2.留取已诊断的2例半乳糖血症患儿治疗前尿液，1例分装成12份作为日问重复试验测试标本(每日检测1份)；1例分装成10份作为日内重复试验测试标本(同1日检测)。
3.留取10例半乳糖血症患儿治疗前后、2例酪氨酸血症患儿、10例病毒性肝炎患儿和60例正常健康儿童尿液标本。
4.尿液采用尿素酶去尿素，吹干、衍生化后进行GC-MS检测。
5.应用质谱仪检索NIST图谱库定性检测到的尿液代谢产物。
3.以正十七烷酸作为内标物质，应用内标法以内生肌酐定量代谢产物。
结果:
1.5份多种羧化酶缺乏症患儿尿液均检出3-甲基巴豆酰甘氨酸，30份正常健康儿童尿液无1例检出。
2.12份同1例半乳糖血症患儿尿液半乳糖醇检测结果最低为118.3mmol/mol肌酐，最高为151.6mol/mol肌酐，平均为134.3±9.2mmol/mol肌酐，日间变异系数为6.87％，10份同1例半乳糖血症患儿尿液半乳糖醇检测结果最低为201.2mmol/mol肌酐，最高为264.6mmol/mol肌酐，平均值为228.2±23.2mmol/mol肌酐，日内变异系数为10.17％。
3.10例半乳糖血症患儿治疗前尿中可检出至少34种以上代谢产物，酪氨酸、4-羟基苯乙酸、4-羟基苯乳酸、半乳糖、半乳糖醇、半乳糖酸和假尿嘧啶7种代谢产物明显高于正常对照组(P＜0.05)，其中半乳糖、半乳糖醇和半乳糖酸分别为925.34(10.23～3906.77)mmol/mol肌酐、727.05(99.69～4414.74)mmol/mol肌酐和302.76mmol/mol(89.15～685.19)肌酐，而正常对照组(0～95位百分位数)分别为150.54(测不出～806.97)mmol/mol肌酐、10.64(测不出～92.67)mmol/mol肌酐和63.60(测不出～177.39)mmol/mol肌酐。β-氨基异丁酸和二氢尿嘧啶则明显低于正常对照组(P＜0.05)；治疗后除4-羟基苯乳酸外，增多的代谢产物均下降至正常水平。
4.酪氨酸血症患儿与病毒性肝炎患儿尿中也可检出酪氨酸、4-羟基苯乙酸、4-羟基苯乳酸、半乳糖、半乳糖醇和半乳糖酸，但与酪氨酸血症患儿比较，半乳糖血症患儿尿中酪氨酸较原发性酪氨酸血症患儿低(P＜0.05)，半乳糖醇、半乳糖酸则明显高于原发性酪氨酸血症患儿(均P＜0.05)，与病毒性肝炎患儿比较，半乳糖血症患儿尿液中4-羟基苯乙酸、4-羟基苯乳酸、半乳糖醇、半乳糖酸均明显高于病毒性肝炎患儿(均P＜0.05)。
结论:
1.尿素酶前处理尿液GC-MS检测方法灵敏度和重复性良好。
2.尿液GC-MS检测分析可提示半乳糖血症诊断，尿中半乳糖≥806.97mmol/mol肌酐、半乳糖醇≥92.67mmol/mol肌酐、半乳糖酸≥l77.39mmol/mol肌酐时提示半乳糖血症可能，但仍需注意与其它疾病鉴别。
3.尿液内的β-氨基异丁酸、假尿嘧啶、4-羟基苯乳酸可能可以作为监测肝功能是否恢复的指标。