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猪传染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia,PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的一种猪的接触传染性疾病。不同国家和地区流行的血清型不同,给养殖业带来严重的经济损失。疫苗免疫接种是防治PCP的有效措施,但是目前商品化的APP疫苗主要是针对血清型1、2和7的,不能满足特定地区流行的其他血清型的需求。本研究以前期分离鉴定的APP安徽分离株和福建分离株为受试菌株,从中筛选出优势血清型和生物型的强毒株,研制二价灭活苗,旨在为安徽和福建省PCP的防控提供物质基础。首先,从17株APP分离株中筛选强毒株。将17株APP分离株于37℃,150rpm/min培养至对数期,以7×107CFU/mL、1.4×108CFU/mL和2.8×108CFU/mL三个不同浓度菌液腹腔注射昆明系小鼠,根据小鼠死亡情况,初步确定分离株BB1502和FJ1508为强毒株。然后,采用细菌学方法测定分离株BB1502和FJ1508对小鼠的半数致死量(LD50);制作病理组织切片,观察病理变化;以灭活后菌株免疫小鼠,测定其免疫原性、免疫保护性和交叉保护性。结果显示,分离株BB1502和FJ1508对小鼠的LD50分别为4.9×108 CFU/mL和1.75×108 CFU/mL,多个组织病理变化明显。鼠抗BB1502和FJ1508抗体的琼扩效价分别为1:32和1:16。BB1502灭活菌体对小鼠的免疫保护率约为90%,FJ1508灭活菌体的免疫保护率约为70%;BB1502灭活菌体对FJ1508菌株的免疫保护率约为10%,FJ1508灭活菌体对菌株BB1502没有保护力。结果表明,分离株BB1502和FJ1508具有良好的免疫原性和免疫保护性,可以作为疫苗候选菌株。最后,将分离株BB1502和FJ1508灭活菌体按1:1比例混合,使两株细菌的浓度均为3.0×109 CFU/mL,然后按9:1的比例加入氢氧化铝胶佐剂混匀,制备二价灭活苗,并对其进行无菌检验、安全性检验和效力检验。结果显示,二价灭活苗稳定性和安全性良好,对菌株BB1502和FJ1508的免疫保护力分别为90%和70%。综上所述,本研究通过对17株APP菌株毒力、抗原性与稳定性的测定,成功筛选出BB1502(生物型I型,血清型12型)和FJ1508(生物型II型)两株APP强毒株作为疫苗候选菌株,并研制了APP二价灭活苗,该疫苗对同型菌株攻击小鼠具有较好的免疫保护作用,从而为APP的防治提供了物质基础。