促红细胞生成素对哮喘小鼠气道重塑模型的影响

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目的:探讨促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对卵清蛋白诱导的哮喘小鼠气道重塑模型的影响,为临床应用EPO防治哮喘气道重塑提供实验依据。方法:选择雌性Balb/c小鼠40只(平均体重20±2g),将小鼠随机分为5组:正常对照组A、哮喘模型组B、地塞米松组C、EPO低浓度组D和EPO高浓度组E。各组小鼠(除对照组外)用新鲜配制的200μlPBS溶液[含卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)10μg+明矾佐剂(Alum)50μl],于第1、8、15天各腹腔注射1次致敏。激发急性期哮喘:于第22天起将各组小鼠置于密闭玻璃缸中予2.5%OVA溶液进行雾化吸入,1/d/30min连续7天。激发慢性期哮喘:于第33天始,3/w/30min,共4周;C组小鼠每次激发前予地塞米松1mg/kg腹腔注射;D组于每次激发前背部皮下注射EPO1000IU/kg;E组以同样方法给予2000IU/kg处理;A组予生理盐水代替卵清蛋白进行腹腔注射及雾化吸入.。采集小鼠肺泡灌洗液(BALF),通过ELISA法检测TGF-β1、VEGF、MCP-1和SDF-1水平;小鼠肺组织病理切片行HE染色和Masson染色,观察其病理变化。结果:1)ELISA结果:与A组比较,其它各组BALF中TGF-β1、VEGF、MCP-1及SDF-1水平明显升高(P<0.05),C组与D组较B组明显降低(P<0.05),E组与B组比较无统计学意义。2)HE染色:A组小鼠肺组织结构基本正常,B组小鼠小血管周围明显水肿,支气管周围可见炎性细胞浸润、平滑肌细胞增生并伴有胶原纤维沉积,肺泡间隔增厚。C组小鼠血管周围轻度水肿,支气管周围少量炎性细胞浸润,平滑肌层轻度增厚。D组小鼠支气管周围及肺泡间隔炎性细胞浸润较模型组减少,平滑肌细胞及胶原纤维增生不明显。E组与模型组比较无明显差异。3)Masson染色:A组支气管及肺泡周围无明显胶原纤维沉积,B组气道周围及肺泡间隔可见明显胶原纤维沉积,C组气道周围可见少量纤维沉积,EPO低浓度组及EPO高浓度组纤维沉积较模型组减少。结论:小鼠哮喘气道重塑与体内TGF-β1、VEGF、MCP-1及SDF-1水平相关,并且适当浓度的外源性EPO(1000IU/kg左右)对哮喘小鼠气道重塑模型具有保护性影响,其机制可能是通过降低TGF-β1、VEGF、MCP-1及SDF-1水平实现的。
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