论文部分内容阅读
目的：以壳聚糖(CS)为初始原料,制备水溶性羟丙基壳聚糖(HPCS),进而制备去甲斑蝥素一羟丙基壳聚糖固体纳米粒(NCTD-HPCS-NPs),并研究该载药纳米粒对比原药去甲斑蝥素的体外释药性能,以及对肝癌细胞BEL-7402的体外增殖抑制作用。方法：采用碱化交联法制备羟丙基壳聚糖,离子交联法制备去甲斑蝥素-羟丙基壳聚糖固体纳米粒,并应用_正正交设计试验优化各自制备条件；扫描电镜观察固体纳米粒的形态特性,透析法测定纳米粒的体外释药性；MTT法检测NCTD及NCTD-HPCS-NPs固体纳米粒分别对肝癌细胞BEL-7402体外增殖抑制作用,并测定其各自半数抑制浓度(IC50)。结果：1.羟丙基壳聚糖制备结果表明,HPCS最佳制备条件为：M壳聚糖：V环氧丙烷：V四甲基氢氧化铵=1：10：0.5,T=60℃,此条件下所得HPCS平均取代度为0.42,溶解度为7.5g/L左右,具有较好的水溶性和良好的稳定性。2.载药纳米颗粒制备结果表明：NCTD-HPCS-NPs最佳制备条件(浓度)为NCTD2.0mg/mL、HPCS1.0mg/mL和TPP1.0mg/mL,所制得纳米颗粒平均粒径为95.15±3.81nm,包封率为23.68±1.79%,载药量为54.53±2.61%,整体粒径较小,性质稳定。3.载药纳米粒体外释药性实验结果表明,NCTD体外释药时间平均为3.5h左右,释药量为95%以上,且在开始释药1.5h左右存在明显突释现象；NCTD-HPCS-NPs平均释药时问则为6h左右,同样在开始1h左右存在小幅突释现象,之后表现出明显的缓释作用,最高释药量为80%左右。4.MTT实验结果表明：加药24h后,低浓度(CNCTD=10μg/mL)时,NCTD体外抑癌活性稍高于NCTD-HPCS-NPs,中浓度(20μg/mL≤CNCTD≤80μg/mL)时,NPs抑癌活性则稍高于NCTD,高浓度(160μg/mL≤CNCTD≤640μg/mL)时,NPs抑癌活性更具优势,NPs给药24h后可到66.46%左右；通过Origin8.0软件分析处理,获得NCTD对肝癌细胞BEL-7402的半数抑制浓度IC50为283.72±4.55μg/mL, NPs的IC50为194.26±3.69μg/mL,相比NCTD降低了30%左右。结论：1.制备出的羟丙基壳聚糖,具有较好的水溶性。2. NCTD-HPCS-NPs载药固体纳米粒粒径较小、载药量高、性质稳定。3.载药纳米粒相比原药在体外释放中具有较为明显的缓释性能,释放时间可延长至原药3倍左右,且累计释药量良好。4.相对原药,同药物浓度的载药纳米粒对肝癌细胞BEL-7402的增殖抑制率更大,在单次给药相同的条件下,纳米粒IC50更低,一定程度上增强了药效,降低了毒性。