【摘 要】
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苯丙酮尿症(PKU)是一种氨基酸代谢缺陷症,发病几率为1/160000.苯丙酮尿症的诊断的方法有:细菌抑制法(BIA)、液相色谱法、荧光法和酶的方法,最近串联质谱仪成功地应用于PKU的
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苯丙酮尿症(PKU)是一种氨基酸代谢缺陷症,发病几率为1/160000.苯丙酮尿症的诊断的方法有:细菌抑制法(BIA)、液相色谱法、荧光法和酶的方法,最近串联质谱仪成功地应用于PKU的筛查.在该论文中,我们报道用GC-MS的方法筛查PKU.用0.1﹪盐酸-甲醇溶液提取新生儿的血样中的苯丙氨酸(Phe)和酪氨酸(Tyr),离心过滤除去蛋白.用盐酸正丁醇将Phe和Tyr中的羧基丁酯化,然后用三氟醋酸酐和Phe、Tyr丁酯反应,最后的产物用GC-EI-MS-SIM和GC-CI-MS-SIM分析.通过计算Phe、Tyr衍生物的特征离子峰面积,用外标法定量血样中Phe、Tyr的浓度,根据血样中Phe、Tyr的摩尔浓度的比值来诊断PKU.由于N-甲基-N-(叔丁基二甲基硅烷)三氟乙酰胺(MTBSTFA)能在一步反应中同时将氨基酸中的羧基和氨基以及羟基硅烷化.我们探讨用MTBSTFA将血样中的苯丙氨酸和酪氨酸衍生化,然后用GC-MS分析血样中苯丙氨酸和酪氨酸的衍生物.通过测定衍生物的特征离子的峰面积,用内标法定量了血样中Phe、Tyr的浓度.
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