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糖胺聚糖(Glycosaminoglycans,GAGs),如硫酸软骨素A(Chondroitin sulfate A,CSA),硫酸软骨素B(Chondroitin sulfate B,CSB)或硫酸皮肤素(Dermatan sulfate,DS),硫酸软骨素C(Chondroitin sulfate C,CSC),肝素(Heparin,HP),硫酸乙酰肝素(Heparan sulfate,HS)以及透明质酸(Hyaluronic acid,HA)等,是生物体中一类重要的生物大分子,广泛存在于细胞表面和细胞外基质中。在很多癌症中,均发现糖胺聚糖的含量、组成、分子大小及分子细微结构等发生不同程度的变化,但对于2型糖尿病的研究并不多。因此,本论文的目的在于通过对2型糖尿病肾脏糖胺聚糖组成和结构的研究,揭示在2型糖尿病的发生发展过程中糖胺聚糖的生物学作用。本论文以高脂饲料加果糖水饲喂诱发胰岛素抵抗,然后注射小剂量链脲菌素(streptozocin,STZ)的方法以构建2型糖尿病Wistar大鼠模型。模型组大鼠血糖为25.0±2.8 mmol/L,远高于正常组4.0±0.4 mmol/L(P<0.01),也高于11.1 mmol/L的糖尿病标准,成功建立了2型糖尿病大鼠模型。本论文以大鼠肾脏为原料,对组织中糖胺聚糖的提取、分离纯化的方法进行了探索,采用丙酮-氯仿脱脂,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶联合酶解的方法,从肾脏中提取出微量的糖胺聚糖并通过透析、离子交换色谱、凝胶过滤色谱进行了纯化。本论文对大鼠肾脏组织中微量糖胺聚糖组成分析方法进行了探索,分别以咔唑法分析糖胺聚糖总含量,HPGPC法分析其分子量,并通过比较阴离子色谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳、醋酸纤维素薄膜电泳,建立了醋酸纤维素薄膜电泳灰度积分定量糖胺聚糖各组分的方法。利用建立的方法对糖尿病和正常大鼠肾脏糖胺聚糖进行分析,发现糖尿病大鼠和正常大鼠肾脏糖胺聚糖均由硫酸皮肤素和硫酸乙酰肝素组成;糖尿病大鼠糖胺聚糖总含量较正常大鼠增多(P<0.01),尤其硫酸皮肤素明显增多(P<0.01),而硫酸乙酰肝素含量和分子量均无明显变化。此外,本论文还对各糖胺聚糖细微结构进行了分析,采用特异的糖酶将糖胺聚糖各组分水解为二糖,通过高效液相离子交换色谱将各二糖分离并确定其含量。结果表明,糖尿病大鼠糖尿病组硫酸软骨素二糖中非硫酸化二糖较正常组有明显增加(P<0.01),二硫酸化和三硫酸化二糖则较糖尿病组有显著降低(P<0.05);糖尿病组硫酸乙酰肝素二糖中N-乙酰化二糖较正常组明显增加(P<0.01),N-硫酸化和O-硫酸化二糖则明显降低(P<0.01,P<0.05)。综上,本论文首次系统的分析了2型糖尿病大鼠肾脏糖胺聚糖的组成变化及各成分结构的差异,这些差异为揭示在2型糖尿病的发生发展过程中肾脏糖胺聚糖的结构与生物学作用关系提供了有用信息。