光催化对不同耐药靶点耐药菌的灭活动力学及其基因转移影响机制的研究

来源 :广东工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yjc0208
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
抗生素抗性基因(ARGs)在环境中的广泛传播导致了大量抗生素耐药菌(ARB)的出现,这对人类和环境构成了严重的威胁。因此,开发一种高效清除环境水体中ARB和ARGs的方法已成为亟需解决的问题。目前,常用的消毒方法如紫外、氯化和臭氧化不能有效地清除环境中的ARB和ARGs。为此,本论文采用UVA-Ti O2多相光催化氧化这一高级氧化消毒方法系统地考察了其对具有不同抗生素作用靶点(细胞壁、细胞膜的完整性、蛋白、叶酸、DNA和RNA)的ARB及其对应的六种ARGs的灭活效率,同时筛选和优化灭活过程中影响其灭活效率的重要理化参数。在此基础上,研究亚致死或致死光催化氧化条件下对不同抗生素作用靶点的ARB的应激响应以及光催化氧化对其ARGs水平基因转移(HGT)的影响,揭示其内部存在的潜在机制。基于所获得的结果,为光催化氧化在实际水体杀菌消毒应用中对ARB的灭活和阻控ARGs在环境水体中的传播提供更详细的信息。本研究的结果如下:(1)UVA-TiO2多相光催化氧化对环境水体中的ARB和ARGs具有高效的灭活能力,其灭活效率明显高于紫外。首先我们通过响应面法确定了光催化氧化在p H为7.0、温度为25℃、溶解氧浓度为7.0 mg L-1和催化剂浓度为1.5 g L-1的条件下对ARB灭活效率最优。发现光催化氧化在p H为6.5、温度为30℃、溶解氧浓度为6.5mg L-1和催化剂浓度为1.5 g L-1的条件下对ARGs的灭活效率最高。在优化和筛选出的最佳条件下进行光催化氧化可加速ARB的裂解,触发ARB的应激反应,诱导携带有ARGs的质粒发生DNA结构损伤并使其构象发生改变,从而达到优化和筛选光催化氧化灭活最佳条件的效果。(2)不同抗生素耐药靶点影响ARB在光催化氧化作用下的耐受性:ARB在光催化氧化的条件下耐受性明显提高。与ASB相比其存活时间较长,耐药性明显提高。在光催化氧化过程中抗生素耐药性分别对头孢噻肟(CTX)耐药性提高了16倍、对多粘菌素B(PB)耐药性提高效果高达64倍、对四环素(TET)耐药性提高效果高达32倍、对磺胺甲噁唑(SMZ)耐药性提高了16倍、对萘啶酮酸(NAL)耐药性提高了32倍和对利福平(RD)耐药性提高了16倍。抗生素作用于蛋白质合成靶点上的大肠杆菌DH5ɑ(TET)和抗生素作用于叶酸合成靶点上的大肠杆菌DH5ɑ(SMZ)可以通过相关抗生素作用靶点基因的过量表达快速诱导全局调控因子,通过交叉保护机制调节各种应激反应,其对抗不利环境的耐受性远远强于其它靶点的ARB。此外,在光催化氧化条件下,细菌细胞的失活机制和细菌细胞应激的分级反应机制导致抗生素作用靶点的应激机制出现强度上的差异。靶向细胞壁和细胞膜合成的大肠杆菌DH5ɑ(CTX)和大肠杆菌DH5ɑ(PB)与靶向DNA和RNA合成的大肠杆菌DH5ɑ(NAL)和DH5ɑ(RA)相比,前者在维持细胞形态、抗氧化酶活性、氧化应激效果上表现突出,为其在不利环境下提供更多的生存优势。(3)最后,我们研究了UVA-TiO2多相光催化氧化调控ARGs的水平基因转移,发现ARGs的浓度在高强度、长期的光催化氧化诱导下发生显著下降。部分ARGs如sul3和mcr-1可在24 h的光催化氧化条件下被完全灭活。同时,我们也发现,在ARB暴露于光催化下处于致死或亚致死状态时,ARGs几乎不受光催化氧化的影响,其ARGs浓度基本保持不变,维持在7.5 log的拷贝数水平。此外,光催化氧化作用下处于亚致死状态的ARB能够促进其ARGs在环境水体中的水平基因转移,在20min的光催化氧化过程中促进效果明显。其中,接合转移频率与抗生素作用靶点的应激响应机制有关,高强度抗生素作用靶点的应激响应能够提高接合转移的发生频率,是光催化氧化反应前期水平基因转移的主要方式,其诱导ARGs发生接合转移的频率约为45%。相比之下,转导是光催化氧化反应中后期水平基因转移的主要方式,其触发ARGs发生转导的频率约为58%。ARGs在自然转化和转导效率受光催化氧化调控,受体菌通过相关水平转移基因的过量表达以提高ARGs在环境水体中的传播能力。供体菌通过ctr A调控因子介导自然转化和转导的发生,Rc GTA基因的过量表达提高了转导过程的发生频率,这是转导作为光催化氧化反应中后期水平基因转移主要发生方式的原因。综上所述,本论文深度揭示了ARB在光催化氧化消毒过程中耐受性的变化的机制。同时,确定了光催化氧化消毒过程对环境水体中ARGs发生HGT的主要方式及其原因,为光催化氧化灭活ARB和阻控ARGs在环境水体中的传播提供理论指导。
其他文献
质子交换膜燃料电池因为使用可再生能源,无温室气体排放,符合我国“碳达峰”和“碳中和”政策,有望成为下一代能源存储技术。质子交换膜燃料电池中的氧还原反应(ORR)对Pt金属有强烈的依赖性,金属Pt稀缺、价格昂贵、容易中毒以及使用寿命短。因此目前亟需发展高性能、寿命长的Pt催化剂。由于Pd具有与Pt相近的电子结构,较低的晶格错配率以及抗酸性强,选择Pd作为第二金属制备的Pt Pd催化剂有望提高Pt电催
学位
羰基化合物是大气中一类重要的含氧挥发性有机物,在大气化学过程中扮演着关键角色,对生态环境、人体健康等都会造成重要影响,其在颗粒物上的非均相反应存在气粒分配等问题。矿物颗粒物和无机盐作为大气反应的主要介质,是大气颗粒物特别是PM2.5的主要贡献者。矿物颗粒物不同的比表面积和结构使其具有不同的物理性质以及化学反应活性,其沉降过程与呼吸、心血管系统疾病以及空气污染密切相关。无机盐受到二次转化、生物质燃烧
学位
随着信息技术的快速发展,互联网、移动终端等成为了购物的首选方式,国内各大企业纷纷开始在新零售领域进行布局。与此同时,传统实体店销量锐减,店铺租金上涨、人工成本一路走高,利润空间不断被压缩,传统零售模式逐渐褪去自身高光,无法很好的适应当今市场环境。传统零售企业迫切需要在新技术、新市场和新竞争背景下进行创新发展。知名服装企业太平鸟于2016年启动新零售布局,该布局历时三年初步完成,其生产、流通和营销等
学位
在去中心化数字资产的交易监管资源供给不足的情况下,全球范围内暴露出一系列风险问题。交易所的中心化自律管理如何应对来自具有去中心化特征的数字资产交易及其利益相关者的新挑战。本文以受到市场广泛认可的Coinbase交易所为案例,开展研究。该交易所面对来自安全交易、合规效率、共识对话等三个层面的市场监管矛盾,经过十年发展,建立起中心化自律管理体系,应对技术安全、价值评估、市场认知不确定性、一致性监管标准
学位
随着我国整形外科技术逐渐成熟,光电类医美设备不断更新,医美项目原材料价格持续下降,以及“颜值经济”以前所未有的速度发展,大量不同年龄段、职业、收入水平的求美者开始不断地涌入蓬勃发展中的医美市场。但是,黑医美乱象频发,媒体曝光的医美纠纷与冲突事件也越来越多,解决医美机构与客户关系紧张问题、构建医美机构与客户之间的良好关系就显得尤为重要。本文围绕着医美机构客户关系这一主题,站在医美机构的角度,基于顾客
学位
近年来,由于细胞内G-四链体的形成与肿瘤发生发展、肿瘤凋亡等具有密切联系,被视为抗肿瘤药物开发的新靶点。对于研究线粒体DNA G-四链体的形成对肿瘤治疗的效果、细胞内的调控机制,最有效的方法之一就是开发荧光配体,结合荧光显微成像技术实现实时荧光示踪。但目前基于线粒体DNA G-链体荧光配体的开发处于初步发展阶段,相关配体开发仍然不足,检测方法有限。基于此背景,本论文设计并合成了苯并噻唑-三苯胺衍生
学位
神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)是一种转移性脑瘤,在儿童中尤其常见,且高危NB患者治愈率低于50%,所以需要新的治疗药物或方法来提高NB的治愈率。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是一种很有前景的促凋亡因子,能快速、优先地诱导转化细胞和肿瘤细胞凋亡。然而,癌细胞普遍对TRAIL耐药,所以阻碍了该配体的临床应用。此前,我们制备了一种细胞内质网来源的纳米TRAIL(TRAIL-
学位
碳量子点(carbon dots,CDs)作为一类新型碳纳米材料,因其优异的光学性能、高荧光发射、良好的生物相容性在近年来备受关注。这些优异特性使CDs在生物成像、医药医疗、化学传感、生物成像等领域得到了广泛的开发和应用,成为国内外化学、材料学及生物科学等领域的研究热点。不可避免的,CDs在应用及废置的过程中存在泄露并污染环境的可能,导致其潜在的环境和人体健康风险。因此寻找出快速、经济、有效的降解
学位
我国正处于经济转型期,经济发展面临供给冲击、预期减弱和需求收缩三重压力,产业投资基金在缓解中小企业企业融资难、推动地方传统产业升级、优化资源配置等方面起到了突出作用。目前,国内对于产业投资基金的研究主要集中在管理模式、发展现状总结、成立原由等方面,研究还处于较为浅显的阶段,对产业投资基金运营模式的优化研究较少。据此,如何优化现行产业投资基金运营模式是本文主要的研究问题。本文以HL投资为案例,深入分
学位
随着城市化的快速发展,人们所处环境的污染问题也越来越严重。作为人类生存的必要环境因素,大气环境污染严重影响了人们的身体健康,甲醛(HCHO)是最常见的室内空气污染物之一,由于挥发性、剧毒、广泛存在,对人体健康造成严重威胁。寻求高效降解甲醛的方法已成为目前亟需解决的问题。光催化技术因具有能耗低、低成本、高降解效率、无二次污染等优点,越来越受到研究人员的青睐。光催化剂作为光催化技术的核心,大多光催化材
学位