目的：以pGPH1/GFP/Neo质粒为载体，设计构建特异性针对HP450基因 shRNA真核表达载体，并通过脂质体介导转染正常的大鼠肝细胞株（BRL），以探讨靶向干扰HP450基因对BRL细胞生长增殖的影响，为今后研究HP450基因对BRL细胞功能的影响提供实验基础。　　方法：1. pGPH1/GFP/Neo-HP450真核表达载体的构建：针对HP450基因设计合成特异性DNA片段以及一对无关序列的阴性对照DNA片段，将它们插入真核表达质粒 pGPH1/GFP/Neo中构建重组载体。2.大鼠肝细胞株BRL pGPH1/GFP/Neo-HP450质粒的转染：应用脂质体转染技术，将重组的pGPH1/GFP/Neo-HP450真核表达载体转染至大鼠肝细胞株（BRL），并于转染后6h、12h、24h在荧光倒臵显微镜下观察细胞状态。3. pGPH1/GFP/Neo质粒转染BRL对HP450基因表达的影响：实验分为三组，即空白对照组、阴性对照组、质粒转染组，运用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、琼脂糖凝胶电泳技术对各组HP450基因表达进行检测分析。4. pGPH1/GFP/Neo质粒转染BRL对细胞生长增殖的影响：采用MTT比色法检测各组细胞的生长状态，流式细胞术检测各组细胞的周期时相分布。　　结果：成功构建针对 HP450基因 shRNA真核表达载体pGPH1/GFP/Neo-HP450，通过脂质体介导转染大鼠肝细胞株 BRL，经RT-PCR检测，结果显示该重组载体能够特异性下调BRL细胞中HP450的表达水平，质粒转染组与空白对照组对比，差异有显著性（P<0.05），HP450基因表达下调达40％。质粒转染组与空白对照组比较，MTT结果显示质粒转染组对BRL细胞增殖有促进作用（P<0.05）；流式细胞术显示G1期空白对照组细胞为86.45%，质粒转染组为58.30%，质粒转染组比空白对照组降低了32.56%；S期细胞空白对照组为8.29%，质粒转染组为30.57%，质粒转染组与空白对照组比较提高了2.69倍，结果提示质粒转染组细胞增殖的能力增强。　　结论：1.成功构建 HP450的shRNA真核表达载体pGPH1/GFP/Neo-HP450。2.建立转染 shRNA真核表达载体pGPH1/GFP/Neo-HP450至 BRL的方法。3.获得能够特异性下调 HP450基因表达及促进BRL细胞增殖的shRNA真核表达载体，为今后研究HP450基因对BRL细胞功能的影响提供实验基础。