随着人们食品安全意识的逐步增强,对食品安全与健康的关注也日益提高。生鲜产品营养价值高,生产基数、销售额在市场中占比大,而农药残留是威胁生鲜食品安全的一大隐患。生鲜食品中残留的农药在人体富集后,会对身体健康造成极大危害。长期摄入含有农药残留的农产品,大大增加了癌症、心脑血管等慢性疾病发病风险以及胎儿的致畸、死亡风险。近年来为了加强对病虫害的杀灭作用,达到更好的防病防虫效果,多种农药复配、交替使用已成为难以根治的乱象,造成农产品中多种农药交叉残留。生物体长期暴露于复杂的农药混合物中已成为一种更现实的情况,而潜在的农药联合物数量和相互作用往往是未知的。因此,评估不同农药之间的联合毒性效应并探讨其作用机制已成为现在研究趋势。毒死蜱（Chlorpyrifos）是一种广泛用于水果、蔬菜的有机磷农药,苯醚甲环唑（Difenoconazole）是最典型的三唑类杀菌剂之一,它们均能对神经系统造成伤害,但其联合暴露所产生的联合毒性效应未能得到系统的研究。因此,有必要对农药混合物的毒性进行深入的评估研究,阐明其毒性作用机制,为食品安全和人体健康风险评估和标准制定提供参考。本论文的主要目的是在细胞水平上验证毒死蜱与苯醚甲环唑联合暴露所导致的神经毒性。以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y作为细胞模型,首先将细胞存活率作为毒性指标,研究毒死蜱和苯醚甲环唑单独及联合暴露产生的细胞毒性,并通过检测ROS、MDA、SOD、GSH/GSSG等生化指标的活性水平,考察两种农药对细胞氧化应激反应的影响。同时,借助转录组学测序技术筛选毒死蜱、苯醚甲环唑单独及联合暴露致SH-SY5Y细胞损伤的差异表达基因,结合生物信息学分析,探索与神经毒性相关的细胞信号通路。利用qPCR方法检测相关信号通路基因的mRNA表达水平,Western blot方法检测相关信号通路蛋白的表达水平以及利用荧光探针检测细胞内标志分子,进而探讨两种农药致SH-SY5Y细胞损伤的毒性作用机制,主要研究结果如下:（1）毒死蜱和苯醚甲环唑对SH-SY5Y细胞存在毒性。二者单独及联合暴露对SH-SY5Y细胞活力具有时间、浓度依赖性,且呈正相关关系。毒死蜱和苯醚甲环唑在暴露24h时,对SH-SY5Y细胞的半数抑制浓度分别为485.5μM、113.4μM。苯醚甲环唑的细胞毒性要强于毒死蜱。（2）毒死蜱与苯醚甲环唑单独及联合暴露均能导致细胞产生氧化应激反应,激发SH-SY5Y细胞内活性氧的释放,ROS水平升高,诱导脂质过氧化物MDA水平升高,同时抑制细胞抗氧化系统中的SOD活力,加重氧化损伤程度。此外,细胞中还原型谷胱甘肽GSH与氧化型谷胱甘肽GSSG的比值均出现不同程度的上升。（3）通过转录组测序技术检测SH-SY5Y细胞mRNA表达情况,筛选得到差异表达基因,进一步结合GO、KEGG等生信分析寻找可能的代谢通路产生的影响,进而发现毒死蜱、苯醚甲环唑联合暴露导致SH-SY5Y细胞产生与神经毒性相关的铁死亡。（4）对铁死亡信号通路相关基因SLC7A11、ACSL4以及FTH1的表达水平检测后发现在毒死蜱、苯醚甲环唑单独及联合暴露组中均出现了不同程度的上调表达。进一步通过Western blot验证了 NCOA4、NRF2、Keap1、SCL7A11、FHT1及GPX4等铁死亡信号通路相关蛋白的表达水平,其中NCOA4、NRF2、SCL7A11、FHT1在各处理组中均呈现为上调表达,而农药暴露对Keap1、GPX4的蛋白表达呈下调作用。再通过Calcein-AM、FerroOrange、Mito-FerroGreen等检测到细胞内铁离子水平升高。验证及讨论机制表明,毒死蜱、苯醚甲环唑联合暴露引起SH-SY5Y细胞发生铁死亡,从而造成细胞的损伤。