荷叶生物碱的提取及干预小鼠非酒精性脂肪肝的研究

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目的:研究荷叶生物碱提取的工艺;利用复合高脂饮食和低浓度四氯化碳腹腔注射诱导非酒精性脂肪肝小鼠模型;研究荷叶生物碱对小鼠非酒精性脂肪肝的干预作用。方法:(1)提取荷叶生物碱的工艺:利用正交试验方法,研究pH值、提取温度、提取时间、固液比等条件对荷叶生物碱提取的影响。(2)动物模型建立预实验:84只昆明小鼠随机分为3组:对照组,高脂模型组,高脂模型+CCl4组。观察饲养第2、4、6、8周末肝脏形态和病理变化以及测定第8周末血清ALT、AST、TC、TG,以及肝脏TC和TG。(3)以正常方法饲养8周的12只小鼠为对照组,将36只高脂模型+CCl4饲养8周的小鼠分为模型组,易善复组和荷叶生物碱组,每组12只。易善复组灌胃,易善复(多烯磷脂酰胆碱胶囊)150mg/kg体重,实验第2周末开始,1次/天,共6周;荷叶生物碱组灌胃,荷叶生物碱100mg/kg,0.25ml/次,实验第2周末开始,1次/天,共6周。实验结束时,测定肝指数,肝组织TG、TC,肝组织切片制备及病理评分。结果:(1)影响荷叶生物碱提取效果各因素的主次顺序为:提取温度=pH>提取时间>固液比。得到最优化的提取条件为:pH值为2.5,提取温度为90℃,提取时间为2h,固液比为1:15。以该条件提取的荷叶生物碱的纯度为73.4%。(2)动物模型建立预实验:复合高脂饮食+5%CCl4腹腔注射的方式造模,第2周末开始出现炎症细胞浸润,第4周末出现少量脂滴,第6周末出现脂肪病变,第8周末在脂肪病变的基础上,部分小鼠出现了肝纤维化,8周末小鼠肝指数、血清TC、TG、ALT、AST,肝脏TC、TG含量明显升高(P<0.05或P<0.01)。(3)荷叶生物碱对小鼠非酒精性脂肪肝的干预作用:干预42d后,荷叶生物碱组的肝指数、血清tc、tg、alt、ast,肝脏tc、tg含量明显降低(p<0.05或p<0.01)。光镜观察结果表明,干预后肝组织脂质变性及肝纤维化程度改变明显减轻(p<0.01)。结论:1、提取荷叶生物碱的最佳条件:温度为90℃,ph值为2.5,提取2h,固液比为1:15。获取的荷叶生物碱的纯度为73.4%。2、荷叶生物碱能降低血液和肝脏组织中的tc、tg、alt、ast含量,有效减缓非酒精性脂肪肝病变的发生与发展。3、荷叶生物碱降低血液和肝脏组织中的tc、tg作用优于易善复。
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