【研究背景】我国肝癌的发病率和死亡率逐年上升,肝细胞癌(HCC)约占肝癌病例总数的70%~85%,其中约90%的HCC患者存在乙型肝炎病毒(HBV)感染,即乙型肝炎病毒相关性肝细胞癌(HBV-HCC)。大部分患者在确诊时就已经处于疾病中晚期,肝动脉化疗栓塞术(TACE)是目前国际公认的、肝癌非手术切除的首选方法。有研究表明,TACE术后使用中药治疗,能够降低术后不良反应,改善免疫功能,提高临床疗效以及延长患者生存时间等。养正消积胶囊、安替可胶囊及华蟾素胶囊等中药制剂已经在肝癌临床治疗中得到广泛应用。目前,部分肝癌患者治疗后的长期生存率仍维持在较低水平,有效的预后分子标志物有助于预测治疗疗效。故而,探寻非侵入性的、有效的肝癌预后分子标志物至关重要。临床上最常用的肝癌诊断及预后的分子标志物是甲胎蛋白(AFP),但其敏感性不高。游离核酸(cfNA)作为新兴的分子标志物受到广泛关注,包括游离DNA(cfDNA)、游离RNA(cfRNA)以及游离线粒体DNA(ccf-mtDNA),已被用于早期诊断、预后评估以及疗效监测等不同方面。近年来的研究显示,血浆或血清样本中的游离mtDNA含量与多种疾病有显著相关性,有研究报道了游离mtDNA含量与HBV-HCC的风险相关性。然而,游离mtDNA含量与HBV-HCC患者预后的相关性研究仍较少。【研究目的】为了进一步提高TACE联合中药治疗HBV-HCC患者的长期生存率,探寻有效的潜在分子标志物。本研究将重点探究血清中的游离mtDNA与TACE联合中药治疗HBV-HCC患者预后的相关性,及其在TACE联合中药治疗疗效预测和监测中作用。【研究方法】本研究采用回顾性队列研究。收集2015年1月至2018年3月于郑州市某医院感染科接受治疗的肝病患者血清,确定141例HBV-HCC患者,根据电子病历和科室检查数据资料整理患者的临床信息。(1)利用QIAamp DNA Blood Mini Kit试剂盒提取血清DNA样本,并使用Qsep100全自动毛细管核酸蛋白分析系统检测提取的DNA质量;(2)利用实时荧光定量PCR(qRT PCR)建立了游离mtDNA定量检测方法;(3)采用t检验和非参数检验分析患者人群特征的分布情况;采用Kaplan-Meier方法绘制游离mtDNA与患者生存预后的生存曲线;采用Cox比例风险回归模型进行单因素和多因素分析,探究游离mtDNA与患者预后的相关性;(4)采用t检验或非参数检验比较不同组之间的连续变量;采用χ~2检验或Fisher精确检验比较不同组之间的分类变量,探究游离mtDNA含量在TACE联合中药治疗疗效预测及监测中的作用。【研究结果】(1)血清游离mtDNA含量高值是TACE联合中药治疗HBV-HCC患者预后的独立危险因素(HR=4.010,95%IC=1.252-12.844;P=0.019);(2)HBV-HCC患者进行TACE联合中药治疗后,血清游离mtDNA含量总体呈现升高趋势(P=0.051),在疾病进展(PD组)患者中尤为明显(P=0.001),且游离mtDNA含量降低组患者的疾病控制率(DCR)明显高于升高组患者(χ~2=6.595,P=0.010)。【研究结论】血清中游离mtDNA含量在TACE联合中药治疗HBV-HCC患者预后及疗效监测中具有一定价值。因此,游离mtDNA有可能作为肝癌患者预后的潜在分子标志物。