鹅毛用处很多,尤其是鹅羽绒保暖性能好、蓬松度高,具有较高的经济价值。但多年来,人们只研究了营养成分对鹅毛生长的影响,一直缺乏对于鹅毛生长发育机理方面的探讨。国外以鸡作为模式动物,发现Bmp4基因对于羽毛的生长发育具有重要调控作用,因此本试验从鹅皮肤中克隆得到了Bmp4基因部分cDNA序列,并采用组织原位杂交技术,对Bmp4基因在鹅胚胎期皮肤及羽芽中表达部位的变化进行了研究,初步判断出了Bmp4基因对于鹅皮肤及羽毛生长发育的作用。本试验包括连续的两部分内容,第一部分为序列比对分析。以11日胚龄鹅背部皮肤中提取的总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出鹅Bmp4基因部分cDNA序列。将所得cDNA克隆进pGEM-T easy vector中,经限制酶酶切鉴定后进行测序。将测序结果与鸡、大鼠、小鼠、人和黑猩猩的Bmp4核苷酸序列进行比对,发现多处突变。使用DNAMAN软件进行同源性比较,本试验所克隆的cDNA序列与鸡、大鼠、小鼠、人和黑猩猩该基因相应区段的同源性分别为94.36%、79.69%、77.85%、78.35%和78.35%。将其转换成氨基酸序列后发现鹅BMP4的氨基酸序列与其他物种也有多处不同。鹅BMP4氨基酸序列与鸡、大鼠、小鼠、人和黑猩猩相应区段的同源性分别为95.28%、87.04%、87.96%、87.16%和86.24%。推测它们之间序列的变化可能是造成禽类和哺乳类之间羽毛和毛发形态学差异,以及鹅羽绒形成的原因之一。第二部分为组织原位杂交。采用体外转录方法,以连接有Bmp4基因部分cDNA的线性化pGEM-T easy vector为模板,合成DIG标记的cRNA探针。同时,分别取12、13和14胚龄鹅背、腹及胸部皮肤制备冰冻切片。经过预杂交、杂交、杂交后洗脱以及显色,发现Bmp4基因在鹅胚背、腹及胸部皮肤的表达规律基本相同,始终在表皮的上皮细胞中表达,推测Bmp4基因与鹅毛基板形成、羽芽形成及延伸有关,并进而影响到羽毛的形成和分支。本试验首次扩增出鹅Bmp4基因部分cDNA序列,并将测序结果与其他动物进行比对,提出Bmp4基因很有可能是影响毛发形态的因子之一。另外,首次采用原位杂交技术将Bmp4基因在鹅胚皮肤及羽芽中进行定位,从而推断出Bmp4基因在鹅皮肤及羽毛形成中的作用。