目的和意义 在肿瘤发生多阶段癌变过程中,癌基因的激活和/或抑癌基因的失活为其中两个重要的分子学事件。肿瘤学研究发现,启动子区高甲基化异常是导致许多肿瘤抑制基因表达异常的内在机制。相对于引起结构异常的基因变异机制,属于表观遗传学机制的DNA甲基化模式随着细胞分裂可得到稳定复制和遗传,而同时甲基化的异常更易于被逆转,在癌变过程中,使异常甲基化逆转,特别是在癌变早期阶段的转变,对于肿瘤的防治尤为重要。由于高度甲基化而暂停表达的抑癌基因,如果能应用去甲基化制剂逆转甲基化的异常状态,使之重获表达,理论上即可发挥其抑制肿瘤细胞生长的功能。 DNA甲基化调节基因表达,某些抑癌基因在肿瘤发生中存在着高甲基化而失活均己得到广泛证实。体外实验已经证实DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′deoxycytidine,5-aza-dC)通过去甲基化作用可使多种含有CpG岛的高甲基化抑癌基因重新表达,从而恢复抑癌功能,这一研究结果对于肿瘤的基因治疗提供了一个新的思路。胃癌治疗中应用相应的去甲基化制剂以改变胃癌细胞的生物学行为的研究,目前尚未见报道。肿瘤抑制基因的失活进而导致蛋白表达下降的机制尚不是十分明确,尤其国内对胃癌原发灶、转移灶和胃正常组织的系统研究甚少。 本研究旨在探讨胃癌的表遗传学发生发展机制,包括:1、检测胃癌原发灶、转移灶和胃正常组织中多种抑癌基因的甲基化状况,寻找在胃癌特异性甲基化的基因;分析多种肿瘤抑制基因甲基化与胃癌临床病理学特征的关系;2、探讨胃癌中多种肿瘤抑制基因甲基化与蛋白表达之间的关系;3、体外应用甲基化抑制剂对胃癌细胞的多种肿瘤抑制基因甲基化水平、基因及蛋白表达的影响,以期为进一步深入探索通过改变抑癌基因的甲基化而为胃癌发生机制和基因治疗提供有意义的数据和理论依据。 方法:本研究采用免疫组织化学方法检测胃癌原发灶、转移灶及正常胃