目的：通过建立新生兔肠外营养相关性肝病(PNALD)模型，研究新生兔肝脏内质网应激相关标志蛋白—糖调节蛋白94（GRP94）的表达变化，探讨GRP94在PNALD发病机制中的作用，并试图揭示鱼油改善PNALD的作用机制，为临床预防和治疗PNALD提供实验依据。材料与方法:母乳喂养7日的新西兰新生兔24只,雌雄不限，随机分为3组，对照组（Control，CON组，n=8）、全胃肠外营养组（total parenteral nutrition，TPN组，n=8）、ω-3鱼油脂肪乳干预组（ω-3Fish Oil Fat Emulsion Intervention，FO组，n=8）。TPN组给予全肠道外营养，经颈静脉置入硅胶管，持续输注静脉TPN营养液（配方组成详见表1）一周；FO组（方法同TPN组）以ω-3鱼油脂肪乳等量替代TPN营养液中的普通脂肪乳剂；CON组给予母乳喂养一周。饲养于恒温暖箱，温度维持在26～28℃之间，相对湿度40%～60%，根据体重调节输液量，按240ml.kg-1.d-1。造模结束后，检测三组血清生化指标变化；取三组肝脏组织行病理切片检测；采用半定量逆转录多聚酶链式反应法（RT-PCR）检测三组肝脏组织中内质网应激相关标识蛋白—糖调节蛋白94（GRP94）mRNA的表达；另取三组肝脏组织采用免疫组织化学技术检测肝脏组织中三组GRP94蛋白表达。结果：1.血清生化指标水平：TBIL、DBIL、γ-GT、ALB在三组间比较，差异均有统计学意义（P<0.01）,而TP、ALT、ALP、TG、TC、PA水平在三组间无显著性差异（P>0.05）。与CON组比较，TPN组血清TBIL（50.25±3.06）μmol/L νs（2.28±1.04）μmol/L、DBIL（47.28±3.91）μmol/L νs（1.05±0.57）μmol/L、γ-GT（130.47±5.61）IU/L νs（14.33±5.46）IU/L均明显升高，差异有统计学意义（P<0.01），ALB（11.73±1.05）g/L νs（26.86±2.83）g/L明显降低，差异有统计学意义（P<0.01）；而FO组与CON组比较，血清TBIL（3.28±1.69）μmol/L νs（2.28±1.04）μmol/L、DBIL（1.76±0.86）μmol/L νs（1.05±0.57）μmol/L、γ-GT（14.33±5.45）IU/L νs（11.28±5.68）IU/L、ALB（26.29±3.12）g/L νs（26.86±2.83）g/L均无明显差异（P>0.05）；与TPN组比较，FO组血清TBIL（3.28±1.69）μmol/L νs（50.25±3.06）μmol/L、DBIL（1.76±0.86）μmol/Lνs（47.28±3.91）μmol/L、γ-GT（14.33±5.45）IU/L νs（130.47±5.61）IU/L均明显降低，差异有统计学意义（P<0.01），ALB（26.29±3.12）g/L νs（11.73±1.05）g/L明显升高，差异有统计学意义（P<0.01）。2.肝脏组织学变化：与CON组相比，TPN组肝脏组织可见肝细胞索结构紊乱，肝细胞弥漫脂肪空泡变性，门脉区可见大量炎性细胞浸润，未见明显胆管增生及胆汁淤积。而FO组肝细胞索形态正常,仅可见少量肝细胞脂肪变性，偶见炎性细胞浸润，汇管区小叶间胆管无增生,胆管无扩张。3．内质网应激相关标志蛋白GRP94蛋白表达：免疫组织化学结果显示，与CON组相比，TPN组肝脏组织GRP94蛋白表达灰度值（133.838±13.664νs78.138±8.169）明显升高（P<0.01），FO组肝脏组织GRP94蛋白表达灰度值（80.727±9.356νs78.138±8.169）与CON组比较无明显差异（P>0.05），但与TPN组相比，FO组肝脏组织GRP94蛋白表达灰度值（80.727±9.356νs133.838±13.664）明显降低（P<0.01）。4.内质网应激相关标志蛋白GRP94mRNA表达：RT-PCR结果显示，与CON组相比，TPN组新生白兔肝脏组织GRP94mRNA表达灰度值（1.217±0.113νs0.614±0.034）明显升高（P<0.01），FO组肝脏组织GRP94mRNA表达灰度值（0.661±0.117νs0.614±0.034）与CON组比较无明显差异（P>0.05），但与TPN组相比，FO组肝脏组织GRP94mRNA表达灰度值（0.661±0.117νs1.217±0.113）明显降低（P<0.01）。结论：1.本实验成功建立新生兔肠外营养相关性肝病模型，为进一步研究其发病机制奠定基础;2. TPN组GRP94mRNA和蛋白表达水平较CON组均有显著升高，提示内质网应激可能与PNALD的发生和发展直接相关；3.ω-3鱼油脂肪乳替代普通脂肪乳剂可有效改善PNALD，其可能通过抑制肝脏组织中内质网应激相关蛋白——GRP94表达而起作用。