大鼠急性脊髓损伤血红素氧合酶-1(HO-1)表达的研究

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目的研究大鼠急性脊髓损伤后血红素氧合酶-1在脊髓组织中表达的变化。方法参照Allen法建SD大鼠脊髓损伤模型(使用10g的金属棒从2.5cm的高度垂直打击SD大鼠的T9-T10脊髓段),45只健康的SD大鼠随机分为三组:正常组(不做任何处理)、假手术组(仅做椎板切除术)、损伤组(SCI组)分为0.5h.4h.8h.16h.24h.48h及72h组。各组SD大鼠均为雌雄各半,为保证各实验大鼠具有可比性,均于术后动物麻醉清醒时给予Tarlov评分一次,SCI组Tarlov评分为5分者大鼠剔除实验(完全正常者没有评估的价值),Tarlov评分为4分及以下者大鼠继续实验,并及时补充相应组剔除的实验大鼠数量。每组在损伤后开始计时,到相应时间点处死动物,对损伤后早期不同时间点应用免疫组化、病理学及图像分析检测HO-1蛋白的表达。应用化学比色法检测不同时间点脊髓中HO活性的变化。结果本实验发现SCI组、假手术组及正常组中的脊髓组织均发现有HO-1的表达。棕黄色或棕褐色为HO-1免疫及原位杂交的阳性着色,这种着色位于细胞浆及突起的根部。在假手术组及正常对照组大鼠脊髓中,HO-1仅有少量的表达,其主要位于脊髓前角的运动神经元,呈散在的分布。SCI组在损伤后4h时HO-1的表达增加,在16h达到高峰,而48h时仍有表达,其主要的分布区域位于中央管周围的灰质和前角,也可见于白质的外侧索以及背侧柱的胶质细胞。而损伤段阳性的染色区域与其出血范围相似,并波及到损伤头侧段、损伤尾侧段背索。SCI组各时间点的HO-1的表达与假手术组及正常组相比较,除0.5h时间点大鼠脊髓组织中的HO-1的表达差别无统计学意义外,其余时间点的HO-1表达的比较均有统计学意义(P<0.05)。结论1.大鼠脊髓损伤后,损伤的脊髓组织中HO-1的表达增加,表明脊髓损伤能诱导HO-1的表达。2.HO-1在脊髓损伤后有明显的高表达,其参于了脊髓损伤的病理生理过程,对脊髓损伤后的脊髓组织具有一定的保护作用;大鼠正常的脊髓组织中只有少量HO-1的阳性表达。3.急性脊髓损伤后可以通过增加HO-1的表达来保护脊髓组织,减轻脊髓组织的损伤,保护神经细胞。
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