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[目的]评估蜂胶经壳聚糖包合后,对Beagle犬实验性牙周炎中牙龈卟啉单胞菌(Pg),伴放线放线杆菌(Aa)、中间普氏菌(Pi)和具核梭杆菌(Fn)4种牙周主要致病菌的抑菌作用。[方法]1.建立牙周炎模型：成年雄性Beagle犬3只,分笼饲养,采用丝线结扎法建立实验性牙周炎模型,定期检测相关牙周指标并摄X线片。2.设计引物并验证引物特异性：设计Pg,Aa、Pi、Fn4种目标细菌和内参的特异性引物,采用PCR验证引物的扩增效率及特异性,验证4种目标细菌的存在。3.Real-time PCR测定蜂胶对4种牙周致病菌的抑菌作用：将3只犬口腔总共12个象限分为4组：蜂胶组,“派丽奥”组、壳聚糖组、空白对照组,用干净的空“派丽奥”注射器对实验区域牙局部给药,每7天给药一次；给药前后分别采样,自制取菌环在实验牙近颊,近舌,远颊,远舌4个位点采集细菌。采用PCR产物胶回收法制作4种目标细菌和内参的Real-time PCR标准曲线：Real-time PCR测定Pg, Aa、Pi、 Fn在各组中给药前后细菌数量上的变化,数据归一化,统计分析评估壳聚糖包合的蜂胶对上述4种目标细菌的抑菌效果。同时比较给药前后牙周袋深度和附着丧失水平的变化。[结果]1.丝线结扎后2个月各项牙周指标及X线片均提示牙周炎发生,建模成功。2.PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果显示产物条带与目的条带大小一致,条带单一无杂带,无明显引物二聚体,成功检测到4种目标细菌的存在。3.各个目标细菌和IC标准曲线相关性良好(0.98以上),扩增效率位于90%-120%之间,达到要求标准；Real-time PCR检测发现Aa在给药1周和3周时,发现蜂胶组与空白对照组之间存在差异,P=0.011；Fn在给药后24小时发现蜂胶组与空白对照组间存在差异(P=0.025),其余时段均无差异；Pg和Pi各个组间未见明显差异,各个组间统计结果显示P值均>0.05；给药后统计发现蜂胶组和“派丽奥”组牙周袋深度减小和附着丧失水平减轻有统计学差异。[结论]1.采用丝线结扎法可在Beagle犬上成功建立实验性牙周炎模型,Beagle犬适用于有关牙周炎的研究。2.引物特异性佳,扩增效率高,成功检测到4种目标细菌,扩增出相应目的片段,合乎实验要求。3.蜂胶对Aa和Fn有一定的抑制作用；对Pg和Pi无明显抑制作用,就牙周袋深度的变化和附着丧失水平在给药后的改善而言,蜂胶对实验性牙周炎具有一定的治疗效果。