苹果MdCER6的克隆、表达及对乙烯调控的反应

来源 :山东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:moniter2001
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表皮蜡质是植物与外界接触的第一道屏障,在植物生长发育和抵御外界不良环境等方面起着重要的作用。蜡质的合成决定了蜡质的组成、结构和功能。拟南芥中研究发现,β-酮脂酰-Co A合酶(KCS)是蜡质合成过程中限速酶,CER6是控制KCS合成的关键基因。本论文通过克隆红星苹果表皮MdCER6,分析其生物学功能,并在苹果不同发育阶段和采后贮藏期间,研究了乙烯和1-MCP对MdCER6表达和对表皮蜡质含量的影响,以期初步阐明乙烯通过MdCER6调控苹果表皮蜡质合成的分子机制,为从基因水平研究乙烯调控苹果表皮蜡质合成机制提供参考。主要结果如下:1、从红星苹果果皮中克隆得到MdCER6基因片段,获得其全长,经生物信息学分析表明,该基因编码苹果表皮KCS,控制苹果表皮蜡质中超长链脂肪酸(VLCFAs)的合成。2、在苹果果实生长发育期和采后贮藏期,MdCER6均有表达:在采前7 d和贮藏30 d、60 d相对表达量较高,其余阶段表达量均较低。红星苹果表皮蜡质质量分布密度及二十八烷酸含量的变化均与MdCER6相对表达量的变化表现一致。3、在苹果采前阶段,乙烯对氨基环丙烷羧酸合酶(ACS)活性以及MdACS1和MdACS3的表达均有促进作用,1-MCP则起抑制作用;乙烯对MdCER6与MdACS1和MdACS3的表达不存在共调控关系;乙烯和1-MCP对氨基环丙烷羧酸氧化酶(ACO)活性变化无明显影响。4、在苹果贮藏期间,乙烯促进了MdCER6的表达,并通过对其表达的调控,影响苹果表皮蜡质质量分布密度的变化;1-MCP延缓了MdCER6表达高峰出现的时间。乙烯提高了ACS活性,1-MCP对ACS活性在前期(系统I乙烯)有轻微促进作用,在后期(系统II乙烯)有明显抑制作用;乙烯对ACO活性有一定的促进作用,1-MCP基本抑制了ACO活性;该结果表明,乙烯和1-MCP对MdCER6的表达和ACS活性及ACO活性分别存在共调控关系。5、在苹果采前阶段,乙烯加速了苹果表皮蜡质质量分布密度高峰出现的时间,促进了果实呼吸速率和硬度下降,降低了坐果率;1-MCP则抑制呼吸速率和硬度下降。在苹果贮藏期间,乙烯促进了表皮蜡质质量分布密度的提升,加速了果实的呼吸和乙烯释放速率,加快了果肉硬度和可滴定酸(TA)含量、可溶性固形物含量(SSC)的降低;1-MCP则对表皮蜡质质量分布密度的升高及果肉硬度、SSC、TA含量降低起抑制作用。
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