间充质干细胞是一种来源于中胚层的成体干细胞,具有自我更新和多向分化潜能等特点,可以在再生医学领域发挥重要的作用。经血来源的间充质干细胞(MenSCs)是间充质干细胞中的一员,主要从女性月经血中提取,具有获取方便,安全无毒副作用等优点。相较于其他来源的间充质干细胞,MenSCs没有伦理及创伤方面的困扰,且能不断从同一志愿者获得大量相同遗传背景的细胞。目前,MenSCs已经被用于心肌梗死、I型糖尿病等多种疾病的治疗研究。许多感染性疾病如H7N9,败血症及一些细菌尤其是Gram-的感染均可以引起急性肺损伤,然而,目前尚未发现MenSCs在急性肺损伤(ALI)方面的应用。本课题主要研究MenSCs在ALI的生物治疗中的作用。在本研究中,我们首先对MenSCs的进行了验证,发现分离的细胞呈梭状,表达 CD29,CD44,CD73,CD90,CD105,不表达 CD34,CD45 以及 CD11b,CD14,CD19,CD79a,CD117和HLA-DR分子,符合国际细胞治疗学会制定的MSCs标准,为MSCs中的一员。同时我们证实了 MenSCs具有良好的体外增殖能力,可以进行成骨成脂分化,具有多向分化能力。此外,我们还发现MenSCs可以表达CD140b,CD194,CD221,及CD184等趋化因子或者具有趋化能力的相关因子的受体,可以在多种细胞因子的刺激下进行迁移,发挥靶向治疗的作用。接着,我们探讨了 MenSCs在治疗ALI中的作用。在体外实验中,我们发现MenSCs可以向暴露于LPS的肺支气管上皮细胞BEAS-2B迁移,并保护其活性,减少细胞凋亡。同时,我们在体外对MenSCs进行了诱导,发现诱导后的细胞成扁平的上皮样形状,并表达SPB,SPC和SPD等肺表面活性蛋白。在LPS诱导的ALI模型小鼠体内,我们用X线和病理组织切片证实MenSCs可以缓解小鼠肺部炎症症状,减少损伤。而肺干/湿比和β-catenin蛋白表达的升高及支气管肺泡灌洗液(BALF)总蛋白的下降则提示着MenSCs移植后小鼠肺通透性的改善。我们对BALF中炎性细胞,MPO检测进一步验证了 MenSCs抑制肺部炎症的作用。同时,我们还发现MenSCs可以提高PCNA的表达量,减少Caspase-3的表达量,促进损伤肺的修复。最后,我们探讨了 MenSCs治疗急性肺损伤的可能机制。我们发现,在MenSCs移植后,小鼠BALF,血清及肺实质中抑炎症因子IL-10,TGF-β表达升高,促炎症因子IL-1β和IL-6表达降低,表明MenSCs可能是通过免疫调节的作用来抑制炎症。同时,我们检测了肺实质中KGF及VE-cadherin,β-catenin的表达,发现其表达量在MenSCs移植后均升高,表明MenSCs可以促进黏附蛋白的表达,形成黏附连接,促进细胞增生和修复。我们用WB检测了肺组织中PI3K,p-gsk3β,gsk3β,p-Src和Src蛋白的表达量,发现PI3K,gsk3β/β-catenin及Src可能参与了肺的修复。这些结果表明MenSCs可以在LPS介导的小鼠急性肺损伤中发挥治疗作用。