Micro RNA(mi RNA)是一类长约22 nt的非编码RNA,是生物体内重要的转录后调控因子之一,参与调节植物的生长发育以及胁迫响应等过程。番茄(Solanum lycopersicum)是一种世界范围内广泛种植的重要经济作物,由致病疫霉侵染(Phytophthora infestans)造成的番茄晚疫病和盐、旱等逆境胁迫,常给番茄的生产带来巨大损失。mi R482是一类与抗病相关的,在茄科植物中高表达的保守性mi RNA,其靶基因编码的NBS-LRR蛋白是植物体内一类参与生物胁迫响应的免疫受体蛋白。与过表达植物mi RNA技术相比,沉默mi RNA的技术目前也已成为研究的一个热点,STTM技术、Anti-am RNA技术等新技术的涌现表明该领域已逐渐成熟。本研究采用两种mi RNA沉默技术,抑制番茄中mi R482a的表达,分析沉默mi R482a对番茄晚疫病及盐、旱抗性的影响。首先,本研究利用生物信息学手段预测了番茄中mi R482a的上游启动子元件及其靶基因,并分析了其在病原菌、激素、盐和旱胁迫下的表达特性。结果表明,mi R482a对上述所有胁迫均会做出响应。其次,本研究采用实验室前期构建的两种mi R482a沉默载体,通过瞬时侵染和稳定表达两种方法将沉默载体导入番茄,成功构建了瞬时沉默系统并获得了稳定沉默的转基因番茄植株。分析发现,沉默载体能够抑制番茄体内mi R482a的表达,促进其靶基因的表达。最后,采用病原菌、高盐和干旱等生物和非生物胁迫对稳定沉默的转基因番茄植株进行处理,与野生型植株相比,转基因沉默植株的生理生化指标发生了显著性变化,增强了对晚疫病和盐、旱的抗性。本研究首次以沉默mi RNA技术探索mi R482a的相关功能,为番茄抗病、抗逆研究奠定基础。