【摘 要】
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目的:观察受体络氨酸激酶AXL(Anexelekto)对胆囊癌细胞增殖、侵袭能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:1.免疫组化方法检测AXL在胆囊癌组织中的表达情况,并结合临床病例资
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目的:观察受体络氨酸激酶AXL(Anexelekto)对胆囊癌细胞增殖、侵袭能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:1.免疫组化方法检测AXL在胆囊癌组织中的表达情况,并结合临床病例资料分析AXL阳性表达的意义2.细胞培养技术传代培养胆囊癌细胞株GBC-SD,借助于RNA干扰技术(RNAi)敲低AXL的表达后,用Western Blot方法检测三个片段的干扰效率,并选取干扰效率最高的一条干扰片段做后续实验3.通过MTT、transwell、流式细胞术和细胞划痕等实验方法观察AXL对胆囊癌细胞的增殖、侵袭能力的影响4.同时用Western Blot(免疫蛋白印迹)方法观察PI3K/AKT通路相关蛋白的表达情况,对AXL的作用机制进行初步探讨。结果:1.免疫组化检测发现胆囊癌组织中AXL的表达明显高于慢性胆囊炎组织(P=0.044<0.05),并且AXL的阳性表达和胆囊癌患者淋巴转移及肿瘤分期密切相,但AXL的表达和肿瘤患者的年龄、性别及瘤体大小无明显相关性(P>0.05);2.成功干扰AXL的表达后,胆囊癌细胞的增殖、侵袭能力均较对照组明显降低(P<0.05),PI3K通路的相关蛋白PI3K(Phosphoinositol 3-kinase,磷酸肌醇-3-激酶)及p-mtor蛋白的表达量较对照组明显降低(P<0.05),提示AXL发挥作用的机制依赖于PI3K通路的激活。结论:受体酪氨酸激酶AXL在胆囊癌组织中存在高表达,并且可以影响胆囊癌细胞的增殖、侵袭,抑制其表达后可明显降低胆囊癌细胞的增殖能力。AXL发挥作用的机制可能和PI3K/AKT通路密切相关,针对AXL及PI3K/AKT通路抑制剂或药物的研发有望改善胆囊癌患者的预后。
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