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目的：
胃癌是中国最常见的恶性肿瘤之一，具有较高的发病率和死亡率，严重威胁着人类生命健康。虽然目前胃癌治疗方法众多，但是其早期诊断率低，且缺乏更为有效的治疗措施。缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）以及三叶因子3（TFF3）能够调节多种信号通路影响肿瘤细胞的增殖及迁移，对肿瘤细胞的代谢活动起着重要作用。而三者之间的相互作用关系，国内外研究报道较少。本研究旨在探究HIF-1α、TIMP1及TFF3在组织层面（60对胃癌及癌旁正常组织）及细胞层面（8种胃癌细胞及1种胃正常细胞）的表达差异性，对HIF-1α、TIMP1、TFF3与胃癌发生发展的相关性以及三者间存在的内在联系进行探讨，并研究HIF-1α与TIMP1、TFF3与胃癌患者临床病理特征的关系。构建HIF-1α基因沉默的胃癌AGS细胞模型，探究HIF-1α在胃癌细胞中发挥的生物学功能及调控的信号通路，最终阐明HIF-1α、TIMP1、TFF3对胃癌细胞增殖及迁移的分子机制，为胃癌的治疗以及HIF-1α、TIMP1和TFF3的临床应用提供理论基础。
方法：
在组织学方面，本实验首先收集了60对胃癌组织及其相应的癌旁正常胃粘膜石蜡组织，并对胃癌组织按照性别、年龄、分化程度、肿瘤大小、肿瘤部位、浸润程度、淋巴结转移、TNM分期进行分组。通过免疫组织化学法对收集组织的HIF-1α、TIMP1、TFF3的蛋白表达及定位进行检测，进一步分析了胃癌组织中HIF-1α及TIMP1、TFF3之间的相互作用以及各临床参数之间的相关性。
在细胞学方面，构建了HIF-1α基因沉默的载体及阴性对照载体，通过慢病毒转染法获得HIF-1α基因沉默的胃癌AGS细胞模型。利用实时荧光定量PCR方法测定细胞内HIF-1α、TIMP1及TFF3表达水平，通过CCK-8法测定细胞的增殖情况以及通过划痕实验检测细胞迁移情况，最后应用蛋白质免疫印迹法对胃癌细胞增殖及迁移相关信号通路蛋白表达情况进行检测。
所有数据采用SPSS19.0统计软件进行数据的分析，多组数据之间的均数比较采用单因素方差分析，两组数据之间的均数比较采用T检验分析，并采用Tukey进行事后检验。计数资料的比较采用χ2检验；关联性分析用Spearman等级相关性分析，各检验方法均以P＜0.05为差异显著标准，具有统计学意义。
结果：
（1）HIF-1α、TIMP1和TFF3在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达具有显著性差异（P＜0.001）；在胃癌组织中，HIF-1α和TFF3的阳性率分别为66.7%和51.7%，而TIMP1阳性率仅为16.7%。进一步通过实时荧光定量PCR对HIF-1α、TIMP和TFF3在胃癌细胞及胃正常细胞中的mRNA表达情况进行检测，HIF-1α和TFF3在胃癌细胞中表达量较高，在胃正常细胞中表达量较低；而TIMP1在胃癌细胞中表达量较低，在胃正常细胞中表达量较高；HIF-1α、TIMP1和TFF3在胃癌细胞中的表达情况与三者在胃癌组织中的表达情况相似。
（2）HIF-1α、TFF3和TIMP1的表达水平与胃癌的临床病理指标（淋巴结转移及TNM分期）具有相关性（P＜0.05）。
（3）Spearman等级相关分析结果显示，在胃癌组织中，HIF-1α的表达水平与TFF3呈正相关关系，相关系数r=0.590；而TIMP1的表达水平与HIF-1α和TFF3呈负相关关系，相关系数分别为r=-0.443和r=-0.283。
（4）HIF-1α基因沉默后，p-p38和p-JNK蛋白表达量升高，p-ERK蛋白表达量下降，胃癌AGS细胞的增殖被明显抑制（P＜0.001）。
（5）HIF-1α基因沉默后，IκB、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量上升，NF-κB、Vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白表达量下降，胃癌AGS细胞的迁移被抑制（P＜0.001）。
结论：
（1）HIF-1α、TIMP1、TFF3的表达变化与胃癌的发生密切相关，HIF-1α及TFF3的表达量与胃癌的发生呈现正相关关系，而TIMP1呈现负相关关系；同时HIF-1α能够促进TFF3的表达，而抑制TIMP1的表达，且TFF3与TIMP1的表达呈负相关关系。
（2）胃癌的淋巴结转移及TNM分期与HIF-1α、TIMP1、TFF3的表达有密切关系。
（3）HIF-1α基因沉默后，激活p38和JNK信号通路并抑制ERK和NF-κB信号通路，抑制胃癌细胞的增殖及迁移。表明HIF-1α可能通过MAPK信号通路参与胃癌细胞的增殖及通过NF-κB信号通路参与胃癌细胞的迁移。
胃癌是中国最常见的恶性肿瘤之一，具有较高的发病率和死亡率，严重威胁着人类生命健康。虽然目前胃癌治疗方法众多，但是其早期诊断率低，且缺乏更为有效的治疗措施。缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）以及三叶因子3（TFF3）能够调节多种信号通路影响肿瘤细胞的增殖及迁移，对肿瘤细胞的代谢活动起着重要作用。而三者之间的相互作用关系，国内外研究报道较少。本研究旨在探究HIF-1α、TIMP1及TFF3在组织层面（60对胃癌及癌旁正常组织）及细胞层面（8种胃癌细胞及1种胃正常细胞）的表达差异性，对HIF-1α、TIMP1、TFF3与胃癌发生发展的相关性以及三者间存在的内在联系进行探讨，并研究HIF-1α与TIMP1、TFF3与胃癌患者临床病理特征的关系。构建HIF-1α基因沉默的胃癌AGS细胞模型，探究HIF-1α在胃癌细胞中发挥的生物学功能及调控的信号通路，最终阐明HIF-1α、TIMP1、TFF3对胃癌细胞增殖及迁移的分子机制，为胃癌的治疗以及HIF-1α、TIMP1和TFF3的临床应用提供理论基础。
方法：
在组织学方面，本实验首先收集了60对胃癌组织及其相应的癌旁正常胃粘膜石蜡组织，并对胃癌组织按照性别、年龄、分化程度、肿瘤大小、肿瘤部位、浸润程度、淋巴结转移、TNM分期进行分组。通过免疫组织化学法对收集组织的HIF-1α、TIMP1、TFF3的蛋白表达及定位进行检测，进一步分析了胃癌组织中HIF-1α及TIMP1、TFF3之间的相互作用以及各临床参数之间的相关性。
在细胞学方面，构建了HIF-1α基因沉默的载体及阴性对照载体，通过慢病毒转染法获得HIF-1α基因沉默的胃癌AGS细胞模型。利用实时荧光定量PCR方法测定细胞内HIF-1α、TIMP1及TFF3表达水平，通过CCK-8法测定细胞的增殖情况以及通过划痕实验检测细胞迁移情况，最后应用蛋白质免疫印迹法对胃癌细胞增殖及迁移相关信号通路蛋白表达情况进行检测。
所有数据采用SPSS19.0统计软件进行数据的分析，多组数据之间的均数比较采用单因素方差分析，两组数据之间的均数比较采用T检验分析，并采用Tukey进行事后检验。计数资料的比较采用χ2检验；关联性分析用Spearman等级相关性分析，各检验方法均以P＜0.05为差异显著标准，具有统计学意义。
结果：
（1）HIF-1α、TIMP1和TFF3在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达具有显著性差异（P＜0.001）；在胃癌组织中，HIF-1α和TFF3的阳性率分别为66.7%和51.7%，而TIMP1阳性率仅为16.7%。进一步通过实时荧光定量PCR对HIF-1α、TIMP和TFF3在胃癌细胞及胃正常细胞中的mRNA表达情况进行检测，HIF-1α和TFF3在胃癌细胞中表达量较高，在胃正常细胞中表达量较低；而TIMP1在胃癌细胞中表达量较低，在胃正常细胞中表达量较高；HIF-1α、TIMP1和TFF3在胃癌细胞中的表达情况与三者在胃癌组织中的表达情况相似。
（2）HIF-1α、TFF3和TIMP1的表达水平与胃癌的临床病理指标（淋巴结转移及TNM分期）具有相关性（P＜0.05）。
（3）Spearman等级相关分析结果显示，在胃癌组织中，HIF-1α的表达水平与TFF3呈正相关关系，相关系数r=0.590；而TIMP1的表达水平与HIF-1α和TFF3呈负相关关系，相关系数分别为r=-0.443和r=-0.283。
（4）HIF-1α基因沉默后，p-p38和p-JNK蛋白表达量升高，p-ERK蛋白表达量下降，胃癌AGS细胞的增殖被明显抑制（P＜0.001）。
（5）HIF-1α基因沉默后，IκB、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量上升，NF-κB、Vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白表达量下降，胃癌AGS细胞的迁移被抑制（P＜0.001）。
结论：
（1）HIF-1α、TIMP1、TFF3的表达变化与胃癌的发生密切相关，HIF-1α及TFF3的表达量与胃癌的发生呈现正相关关系，而TIMP1呈现负相关关系；同时HIF-1α能够促进TFF3的表达，而抑制TIMP1的表达，且TFF3与TIMP1的表达呈负相关关系。
（2）胃癌的淋巴结转移及TNM分期与HIF-1α、TIMP1、TFF3的表达有密切关系。
（3）HIF-1α基因沉默后，激活p38和JNK信号通路并抑制ERK和NF-κB信号通路，抑制胃癌细胞的增殖及迁移。表明HIF-1α可能通过MAPK信号通路参与胃癌细胞的增殖及通过NF-κB信号通路参与胃癌细胞的迁移。