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我国是一个养禽大国,养鸡量位居世界第一。随着养殖量的不断增长,集约化养殖势必给外界环境造成不良影响。因此,一旦养鸡场土壤被污染,其理化性质将会改变,随着病毒在土壤中的不断扩散,不仅会破坏土壤的正常功能,也会进一步污染地下水,对人类健康构成威胁。目前,采用绿色消毒剂对污染土壤的修复等研究相继出现,污染土壤的修复已成为新的研究热点。为此本研究选取H9亚型禽流感病毒为代表,首先建立了检测土壤中H9亚型禽流感病毒的检测方法,然后对相关的消毒剂进行了消毒试验,以有效控制鸡场土壤环境中H9亚型禽流感病毒的污染。1.建立了土壤中H9亚型禽流感病毒的反转录巢式PCR检测方法。本研究选择H9亚型禽流感病毒HA基因为检测靶标,通过设计两对特异性引物,建立了反转录巢式PCR检测方法。对土壤中H7亚型禽流感病毒、新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒进行反转录巢式PCR检测,未发现非特异性扩增,表明该方法具有良好的特异性。敏感性试验结果表明其检测灵敏度为0.5TCID50/g。添加H9亚型禽流感病毒至土壤进行病毒存活时间的检测试验,在病毒污染土壤后的第5天仍能检测到。上述结果表明所建立的反转录巢式PCR检测方法是一种特异性高、敏感性强的快速检测方法。2.应用戊二醛和二氧化氯两种消毒剂对土壤中H9亚型禽流感病毒的杀灭效果进行了评价。两种消毒剂对土壤中H9亚型禽流感病毒的杀灭试验结果表明,两种消毒剂具有较强的杀灭效果,与对照组相比较差异极显著(P<0.001)。戊二醛对以土壤为载体的消毒试验结果表明：0.075%的戊二醛作用5min、0.05%的戊二醛作用10min对H9亚型禽流感病毒的杀灭率达100%。在戊二醛对H9亚型禽流感病毒的田间消毒试验中,0.2%戊二醛作用24h、0.1%戊二醛作用48h对H9亚型禽流感病毒的杀灭率均达到100%；二氧化氯做为消毒剂对以土壤为载体的消毒试验结果表明,300mg/L二氧化氯作用2h对H9亚型流感病毒的杀灭率达到100%。在二氧化氯对H9亚型禽流感病毒的田间消毒试验中,500mg/L二氧化氯作用12h、300mg/L二氧化氯作用24h对H9亚型禽流感病毒的杀灭率均达到100%。研究结果表明：作为土壤消毒剂戊二醛和二氧化氯对被H9亚型禽流感病毒污染的土壤具有良好的消毒效果。