CD73在MAIT细胞介导的抗结核免疫中的作用及机制研究

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【目的】  探讨活动性肺结核(PTB)患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD73+MIAT细胞的功能并分析其抗结核免疫机制。  【方法】  收集PTB患者50例及健康志愿者(HV)33例的PBMC,分离其PBMC中MAIT细胞,流式检测PT B和HV中的MAIT细胞数量;体外结核菌抗原Ag85b刺激后检测MAIT细胞分泌细胞因子Perforin,IL-22的能力;蛋白芯片检测PTB和 HV 中 CD73 蛋白的含量;流式细胞学方法检测 PT B 和 HV 的 PBMC 中CD73+MIAT 细胞的数量;采用单细胞转录组测序技术检测 CD73+MIAT 细胞中与代谢相关基因的表达。  【结果】  1. 肺结核患者PBMC中MAIT细胞,CD73+MIAT细胞含量低于HV志愿者,差异有统计学意义(P<0. 05)。  2. 肺结核患者中,痰阳(SS+)患者PBMC中MAIT细胞,CD73+MIAT细胞含量低于痰阳(SS-)患者,差异有统计学意义(P<0.05),并且 MAIT 细胞, CD73+MIAT细胞细胞含量与年龄和性别无差异。  3. 体外结核菌抗原 Ag85b 刺激实验发现与对照组相比,MAIT 细胞表达Perforin和IL-22的能力下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。  4. 蛋白芯片检测结果发现PT B患者中CD73基因含量低于健康志愿者,差异有统计学意义(P<0. 05)  5. 利用单细胞转录组技术分析CD73MIAT细胞,结果表明CLPB,NT5E, STARD8,UBXN8,GFM2,ARL11,APPL2,ARHGAP31,CREB3,PRKAR1B, CCT4,AHSA1,RAB3GAP2,RASA4,IPO7,UBXN11,PSMC6ENTPD5,ATP13A1, ATP8B2,PMM2,RASGRF2,RAB28,PDE4B,PDE4D 等基因在 CD73+MIAT 细胞中的含量明显高于CD73-MAIT细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。  【结论】  CD73+MAIT细胞异常表达与结核病发生密切相关,当机体感染结核菌后, CD73+MAIT细胞有可能通过提高机体ATP、腺苷的浓度来介导抗结核免疫功能。
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