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目的:检测Twist2在人胃癌细胞系中mRNA和蛋白的表达情况。通过shRNA编码的质粒转染胃癌细胞系,从而抑制Twist2的表达,分析转染前后胃癌细胞中上皮间质转化相关因子钙黏素E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达情况。探讨Twist2在胃癌细胞上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用,并观察Twist2对胃癌细胞的侵袭和迁移能力的影响。方法:1、培养胃癌SGC-7901、BGC-823、MGC-803细胞系,提取mRNA和蛋白后,采用q-PCR和Western blot检测表达水平。2、选择Twist2 mRNA和蛋白表达水平最高的BGC-823细胞系进行进一步的研究。用shRNA编码的质粒转染胃癌BGC-823细胞系。将实验分为三组:空白组(Blank);Twist2阴性对照组(NC-sh);Twist2沉默组(Twist2-sh)。使用q-PCR、Western blot检测上述三组细胞中Twist2mRNA和蛋白的表达情况,以及各组细胞EMT相关因子E-cadherin、Vimentin蛋白的表达情况。3、运用Transwell小室侵袭及迁移实验检测各组细胞的侵袭及迁移能力。结果:1、Twist2 mRNA和蛋白在人胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823及MGC-803中均有表达,且在BGC-823细胞系中的表达水平明显高于其他细胞系(P<0.01)。2、(1)q-PCR检测各组细胞Twist2 mRNA的表达情况,结果显示:与Twist2沉默阴性对照组(NC-sh)相比,Twist2沉默组(Twist2-sh)的Twist2 mRNA表达量下调明显(P<0.01)。(2)Western blot检测各组细胞Twist2蛋白的表达情况,结果显示:Twist2-sh组与NC-sh组相比较,E-cadherin、Vimentin及Twist2蛋白的表达水平均有变化,差异有统计学意义(P<0.01)。Twist2蛋白的表达量明显下调,上皮标志物E-cadherin随Twist2表达的下降而升高,而间质标志物Vimentin随Twist2表达的下降而下降。3、人胃癌细胞系BGC-823 Twist2沉默组的细胞侵袭、迁移能力明显减弱。结论:1、Twist2 mRNA和蛋白在多种人胃癌细胞系(SGC-7901、MGC-803、BGC-823)中存在表达;2、shRNA编码的质粒转染人胃癌细胞系后,可明显抑制Twist2 mRNA和蛋白的表达水平。Twist2的表达下调,可增加E-cadherin的表达,并降低Vimentin的表达,这证明了Twist2可以促进人胃癌细胞的EMT过程;3、Twist2可以通过EMT增加人胃癌细胞的侵袭和迁移能力。