【摘 要】
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目的:研究新型AKT抑制剂MK2206对体外培养的人乳腺癌T47D、MDA-MB-231细胞系增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养的人乳腺癌T47D、MDA-MB-231细胞为研究
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目的:研究新型AKT抑制剂MK2206对体外培养的人乳腺癌T47D、MDA-MB-231细胞系增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养的人乳腺癌T47D、MDA-MB-231细胞为研究对象。以不同浓度的MK2206作用于T47D、MDA-MB-231,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分别检测MK2206对两种细胞的增殖抑制作用,计算各自的IC50值。Annexin V/PI双染法分别检测MK2206对两种细胞的凋亡促进作用。Western印迹法检测MK2206 对乳腺癌细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP、Bcl-2、Bax及Akt相关蛋白磷酸化AKT(p-AKT)和总AKT(T-AKT)蛋白表达的影响。结果:1.MTT结果显示,浓度分别为0.1、1、10和100nmol/L的MK2206处理细胞24h后,T47D、MDA-MB-231的增殖受到抑制,且呈明显的量效关系,IC50分别为(5.139±0.711)和(18.380±1.264)nmol/L。2.AnnexinV/PI 双染法结果显示,MK2206 能诱导 T47D、MDA-MB-231细胞凋亡,作用呈明显剂量依赖性。3.Western blot 检测结果显示,MK2206 促进 T47D、MDA-MB-231 细胞Caspase-3和PARP蛋白剪切,下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,抑制p-AKT蛋白的表达,且均呈剂量依赖性,但对T-AKT表达却无明显影响。结论:MK2206可抑制乳腺癌细胞T47D、MDA-MB-231的增殖并诱导凋亡,其机制可能与抑制AKT磷酸化从而阻断PI3K/AKT信号转导途径有关。
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