论文部分内容阅读
目的：研究Fas基因启动子区-1377G/A(rs2234767)和-670A/G(rs1800682)两个位点在广西地区人群的基因多态性分布,以探索Fas基因多态性与HBV相关性肝炎、肝硬化和肝癌易感性的关系,为评估HBV相关性肝脏疾病患病风险提供有价值的遗传标记,为临床针对性治疗提供理论依据。方法：选取广西地区健康体检者225例,慢性乙型肝炎(CHB)患者110例、HBV相关性的肝硬化(LC)患者88例和HBV相关性的肝癌(HCC)患者258例作为研究对象。提取上述研究对象外周血DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测Fas基因-1377G/A和-670A/G两个SNP位点基因多态性分布,同时抽取部分标本用DNA直接测序技术验证PCR-RFLP法分型的准确性。应用Hardy-Weinberg equilibrium(哈-温平衡)定律分析各组所选研究对象的代表性,用x2检验比较各研究组间的基因型和等位基因分布是否有差异,并用logistic回归分析校正相关的混杂因素,计算OR值和95%CI,评价各基因型和等位基因与HBV相关性肝炎、肝硬化和肝癌易感性的关系。最后利用网络软件SHEsis构建-1377G/A和-670A/G两个SNP位点的单倍型,并比较各病例组与对照组单倍型频率差异。结果：1.各病例组分别与对照组基本资料比较：性别和年龄的构成差异均有统计学意义(p<0.05),HCC组与对照组间民族的构成差异有统计学意义,LC组与对照组间吸烟史的构成差异有统计学意义,CHB组与对照组间饮酒史的构成差异有统计学意义；其余病例组与对照组间的基本资料构成差异均无统计学意义(p>0.05)。两个SNP位点在对照组和各个病例组的基因型分布均符合哈-温平衡定律(p>0.05),表示各组样本均具有良好的群体代表性。2.Fas基因-1377G/A位点共有GG、GA和从三种基因型,-670A/G位点有AA、AG和GG三种基因型,两个SNP位点各自在四个研究组的基因型和等位基因频率分布差异均无统计学意义(p>0.05)；-1377G/A和-670A/G位点基因模型的患病风险比较中,用logistic回归分析对性别、年龄、吸烟、饮酒、民族和BMI进行校正,各病例组的基因型和等位基因与对照组比较差异均无统计学意义(p>0.05)。3.对性别进行分层分析,男性人群中Fas基因-670A/G位点AG基因型患肝硬化风险是AA基因型的2倍(OR 2.222,95%CI 1.033-4.781)。对年龄进行分层分析,≥50岁的年长人群中,-1377G/A位点GA比GG基因型患肝癌风险高约2.8倍(OR 2.761,95%CI 1.270-6.005),-670A/G位点AG比AA基因型显著增加肝癌患病风险(OR 2.863,95%CI 1.341-6.112).对民族进行分层分析,壮族人群中,-1377G/A位点QQ和A等位基因均能显著降低肝硬化患病风险(OR 0.232,95%CI 0.060-0.891和OR 0.522,95%CI 0.286-0.953),-670A/G位点GG基因型和G等位基因均能使肝硬化患病风险下降(OR 0.236,95%CI 0.061-0.922和OR 0.539,95%CI 0.296-0.984)。而在对吸烟、饮酒和BMI的分层分析中,均未发现-1377G/A和-670A/G位点基因型或等位基因与HBV相关性肝炎、肝硬化和肝癌患病风险有关。4.在各病例组和对照组构建-1377G/A和-670A/G两个位点的单倍型,共有AA、AG、GA、GG四种单倍型,各病例组和对照组的单倍型频率分布比较差异均无统计学意义。结论：1.Fas基因-1377G/A位点GA基因型可能是年龄≥50岁的年长人群肝癌患病的危险因素,而在壮族人群中,AA基因型和A等位基因可能是肝硬化患病的保护因素。2.Fas基因-670A/G位点AG基因型可能是男性人群肝硬化患病的危险因素,同时可能是年龄≥50岁的年长人群肝癌患病的危险因素。在壮族人群中,-670A/G位点的GG基因型和G等位基因可能是肝硬化患病的保护因素。3.尚未发现Fas基因-1377G/A和-670A/G位点的单倍型与HBV相关性肝炎、肝硬化和肝癌患病风险有关。