【摘 要】
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分子印迹技术由于其识别的预订性、专一性和实用性等优点,在分离分析科学中有广泛的应用。目前对于小分子的印迹较为成熟,然而由于蛋白质等大分子的一些特殊性质(如分子量大、结
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分子印迹技术由于其识别的预订性、专一性和实用性等优点,在分离分析科学中有广泛的应用。目前对于小分子的印迹较为成熟,然而由于蛋白质等大分子的一些特殊性质(如分子量大、结构复杂、构型不稳定等),对蛋白质的印迹发展较为缓慢。目前对蛋白质印迹的方法中,表面印迹法和抗原决定基印迹法两种方法有效地解决了蛋白质印迹过程中的困难。本文将表面印迹法和抗原决定基印迹法结合起来,分别制备了两种磁性分子印迹聚合物,得到的磁性印迹材料均对目标蛋白有良好的吸附选择性。 本研究主要内容包括:第一章:绪论。主要总结了分子印迹技术概况及其分类,蛋白质分子印迹技术概况及其方法,磁性纳米粒子的制备方法及在分子印迹技术中的应用。此外,还对本论文的选题内容和选题意义做了简单介绍。第二章:基于磁球表面的抗原决定基印迹方法用于选择性识别牛血清白蛋白。通过溶剂热法制备了粒径约为400 nm的四氧化三铁磁性纳米粒子,然后在此表面包裹上一层较薄的硅层,既可以防止磁性纳米粒子的聚沉,又方便下一步的聚合反应。其次,加入牛血清白蛋白的抗原决定基和功能单体进行一定时间的预组装,然后加入交联剂进行聚合反应,洗脱掉模板后即得到牛血清白蛋白抗原决定基的磁性分子印迹聚合物。该材料具有良好的吸附选择性、较快的吸附动力学速度,并成功地应用到牛血样品的分离分析中。三章:抗原决定基磁性印迹聚合物用于选择性识别细胞色素c。本工作同样采用溶剂热法制得四氧化三铁磁性纳米粒子,将其作为载体,表面不进行任何修饰,直接加入细胞色素c的抗原决定基进行一段时间的预组装。然后利用多巴胺在弱碱性条件下自聚的特性,在磁球表面形成一层较薄的印迹层。洗脱掉模板后即得到细胞色素c抗原决定基的磁性分子印迹聚合物。该材料可快速达到吸附平衡,并且对目标蛋白质有较好的吸附选择性。此外,其吸附效果明显优于相应蛋白质做模板的情况。
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