论文部分内容阅读
乳酸菌已由过去的单纯应用于食品领域发展至现在已广泛应用于人畜的防病治病及保健等许多方面,因而乳酸菌制品的分离和保存就显得极为重要。较常用的乳酸菌有双歧杆菌、乳杆菌、链球菌等。正常条件下,乳酸菌较难分离和长期保存。直投式酸奶发酵剂(DVS)中的乳酸菌菌株只能在分离之后稳定传代3次左右,如果长期传代则发酵性能变得不稳定,使发酵乳产品质量下降。有关乳酸菌菌株在传代和保存过程中的遗传稳定性分析在国内外均未见报道。本研究从DNA水平、表型特征、全细胞蛋白质变化及发酵特性等生物学特性方面对从直投式酸奶发酵剂中分离出来的3株乳酸菌菌株传代和保存过程中的遗传稳定性进行分析,为建立乳酸菌传代和保存方法及开发DVS菌种提供实验依据。 实验结果表明:在PY改良培养基当中,乳球菌和杆菌1可稳定传代15次,RAPD结果、表型特征、全细胞蛋白质和发酵特性无明显变化;而杆菌2可稳定传代10次。4℃保存过程中,乳球菌RAPD结果、表型特征、全细胞蛋白质和发酵特性均无明显变化,可连续保存至30d;杆菌1和杆菌2可连续保存至15d。以PY改良培养基加入15%甘油为保护剂于-80℃冷冻保存过程中,乳球菌可保存30d,表型特征、全细胞蛋白质和发酵特性无明显变化;杆菌1、杆菌2可保存15d。冻干保存前后3个DVS菌株均无明显变化,提示冻干法是乳酸菌菌株长期保存的最佳方法之一。 本研究建立了适合DVS菌株传代和保存的方法,同时也为建立一套完整、科学的检验微生物传代和保存过程中遗传稳定性分析方法提供了实验依据。