多吡啶铜(Ⅱ)/钴(Ⅲ)配合物的合成、表征及其生物活性

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邻菲咯啉-铜(Ⅱ)/钴(Ⅲ)-L-氨基酸配合物对DNA有较好的插入作用,并且能在还原剂存在的条件下断裂质粒DNA,有望成为新型的DNA结构探针、化学核酸酶以及抗肿瘤药物;此外,这类配合物还具有良好的SODS舌性,能够有效地清除O<,2><->,可作为SOD模拟酶减轻植物逆境胁迫的伤害;与邻菲咯啉-铜(Ⅱ)/钴(Ⅲ)-L-氨基酸配合物相比,关于三齿多吡啶铜(Ⅱ)配合物的研究较少,三齿多吡啶铜(Ⅱ)配合物与DNA的作用相对较弱,有可能作为新型有效的DNA足迹试剂。因此,研究这些配合物与DNA相互作用及其SOD活性有十分重要的意义。 本论文分别以铜(Ⅱ)和钴(Ⅲ)为中心金属离子,多吡啶为主配体合成了九种新的配合物: [Cu<,2>(L-ala)<,2>(phen)<,2>]<,n>·2nClO<,4>·2nH<,2>O(1); [Cu(phen))(L-ser)(H<,2>O)]Cl(3); [Cu(phen)(L-glu)(H<,2>O)]Cl(4); [Cu(phen)(L-tyT)(H<,2>O)]Cl·2H<,2>O(5)(邻菲咯啉-铜(Ⅱ)-L-氨基酸系列); [Co(phen)<,2>(L-leu)](ClO<,4>)<,2>·H<,2>O(6); [Co(phen)<,2>(L-asp)](ClO<,4>)2·2H<,2>O(7); [Co(phen)<,2>(L-asn)](ClO<,4>)<,2>·H<,2>O(8); [Co(phen)<,2>(L-gln)](ClO<,4>)<,2>·3H<,2>O(9)(邻菲咯啉-钴(Ⅲ)-L-氨基酸系列); [Cu(phpi)Cl<,2>]·H<,2>O(10)(三齿多吡啶铜(Ⅱ)系列)。 并通过X-射线单晶衍射、元素分析、红外光谱、紫外.可见光谱以及摩尔电导率对这些配合物进行了表征。X-射线单晶衍射数据表明,配合物1属单斜晶系,空间群为P2<,1>,结构为L-丙氨酸桥连的一维多聚链状结构,在这个链中,每个铜(Ⅱ)离子与一个邻菲咯啉(N,N’)、一个L-丙氨酸(O,N)在赤道平面上配位,一维链上邻近另一个铜(Ⅱ)中心上的一L-丙氨酸的羰基氧与Cu(Ⅱ)在轴向上配位,构成了一个变形的四方锥配位结构。其他4个铜配合物(3,4,5,10)均为5配位的变形四方锥构型,而四个邻菲咯啉-钴(Ⅲ)-L-氨基酸系列配合物(6,7,8,9)均为变形八面体构型。 本文通过电子吸收光谱、荧光光谱、粘度和琼脂糖凝胶电泳等方法研究了三个系列配合物(包括[Cu(phen])(L-ala)(H<,2>O)]Cl·4H<,2>O(2)、[Cu(tpy)Cl<,2>]·2H2O(11))与CT-DNA之间的相互作用。电子光谱表明,在加入DNA后发现配合物产生明显的减色效应,但红移不明显,表明配合物都能够与DNA发生较弱的插入作用,结合能力大小次序为:4>2>3>5(邻菲咯啉一铜(Ⅱ)-L-氨基酸系列配合物);9>8>6>7(邻菲咯啉-钴(Ⅲ)-L-氨基酸系列配合物);10>11(三齿多吡啶铜(Ⅱ)系列配合物)。荧光光谱显示,配合物可以明显地淬灭EB-DNA体系的荧光,说明配合物能够通过挤出DNA碱基对间的EB与DNA发生插入作用,淬灭能力大小次序为:2>3>4>5(邻菲咯啉-铜(Ⅱ)-L-氨基酸系列配合物);9>8>6>7(邻菲咯啉一钴(Ⅲ)-L-氨基酸系列配合物);10>11(三齿多吡啶铜(Ⅱ)系列配合物)。粘度实验表明加入配合物后DNA的粘度随配合物浓度的增加而增大,进一步证明了配合物与DNA之间是以插入模式作用的。琼脂凝胶电泳方法表明三个系列的配合物在抗坏血酸存在的条件下对pBR322 DNA都有切割作用,DNA切割机理实验则验证了邻菲咯啉-铜(Ⅱ)-L-氨基酸系列和三齿多吡啶铜(Ⅱ)系列配合物都是通过羟基自由基机理对pBR322 DNA进行切割的,而邻菲咯啉-钴(Ⅲ)-L-氨基酸系列配合物则是羟基自由基和单线态氧共同作用的。通过循环伏安法获得了邻菲咯啉-铜(Ⅱ)/钴(Ⅲ)-L-氨基酸系列配合物的氧化还原电位,其E<,1/2>值均在-0.405V-0.142 V(相对于Ag/AgCl)范围之内,推测这些配合物均能有效催化歧化超氧阴离子自由基。 应用改进的NBT光还原法对配合物2-9进行了SOD活性研究,发现其IC<,50>值在0.144-0.525μmol·L<9*-1>之间,Ko值在1.21-5.61×10<7>mol<-1>·L·S<-1>之间,具有良好的SOD活性。SOD活性按以下顺序排列:2>4>3>5(邻菲咯啉-铜(Ⅱ)-L-氨基酸系列),9>8>6>7(邻菲咯啉-钴(Ⅲ)-L-氨基酸系列)。水稻幼苗抗盐胁迫实验表明,配合物3和9在0.1/μmol·L<-1>浓度下能明显提高水稻幼苗的生物量(35%以上)和叶片中的SOD含量(42%以上),有可能成为水稻高效经济、药肥合一的抗盐增产剂。
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