阴虚动风证帕金森LID大鼠氨基酸动态变化的研究

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目的:  观察阴虚动风证帕金森病异动症大鼠氨基酸含量的动态变化及复方地黄方的干预作用,以期揭示帕金森病异动症阴虚动风证的证候本质。  方法:  在本课题前期研究的基础上,采用经典的单侧注射6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)损毁黑质制备帕金森病(Parkinson’sDisease,PD)模型,并在成功PD模型的基础上进一步腹腔注射左旋多巴/苄丝阱[50/12.5(mg·kg)],每日2次,连续2周建立阴虚动风证帕金森病(Levodopa-induceddyskinesias,LID)大鼠模型。在4周、6周时观察模型大鼠的神经行为学改变,并通过高效液相色谱法观察氨基酸类神经递质的动态变化;根据“方证相应”原理,观察复方地黄方对模型大鼠的干预作用,进一步深入探讨氨基酸与帕金森病LID大鼠阴虚动风证的关系。  结果:  (1)神经行为学结果:阴虚动风证帕金森病LID模型大鼠APO诱导旋转圈数增加、AIM评分升高、对侧旋转行为持续时间延长、剂峰旋转圈数增加、旋转启动时间缩短,各结果呈现动态变化;“方证相应”实验结果显示,复方地黄方干预后,模型大鼠APO诱导旋转圈数、AIM评分、对侧旋转行为持续时间、剂峰旋转圈数均减少,旋转启动时间延长并呈动态变化;(2)氨基酸类神经递质实验结果:阴虚动风证帕金森病LID模型大鼠兴奋性氨基酸(Excitatoryaminoacids,EAA)含量随时间延长明显增加(P<0.001),并呈动态变化趋势,尤其谷氨酸(Glutamate,Glu)含量增加最为显著(P<0.001),6周时与4周时相比有极显著统计学意义(P<0.001);抑制性氨基酸甘氨酸(Glycine,Gly)含量显著增加(P<0.001),但γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABA)含量变化不明显;Glu/GABA比值升高(P<0.01,或P<0.001),6周与4周相比差异有显著性(P<0.01)。“方证相应”结果显示谷氨酸含量明显减少(P<0.001),并随用药时间延长呈逐渐减少趋势,6周与4周相比有极显著差异(P<0.001);抑制性氨基酸γ-氨基丁酸含量升高(P<0.05,或P<0.001),随用药时间延长稍有增加(P>0.05);Glu/GABA比值降低,与LID模型组相比差异有极显著性(P<0.001)。  结论:  氨基酸与帕金森病LID模型大鼠阴虚动风证存在明显的相关性,尤其兴奋性氨基酸与抑制性氨基酸相对含量的稳定及功能的平衡与阴虚动风证LID密切相关,能够较好的反应该病证模型的严重程度。
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