前言：LOH12CR1是抑瘤蛋白LKB1的互作蛋白,其具体作用机制尚不明确。THRSP/Spot14是2011年本课题组初步筛选出LOH12CR1的互作蛋白,人Spot14蛋白主要在脂肪生成组织中表达,被认为是脂肪生成必须的蛋白,,且在乳腺癌中经常是高量表达。目的：验证LOH12CR1与THRSP是否存在真正的蛋白质互作关系,为LOH12CR1的功能研究提供新的方向。方法：本研究将构建的pcDNATM3.1/myc-His-LOH12CR和pCMV-tag2B-THRSP重组质粒共同转染HEK293细胞,通过免疫共沉淀技术验证二者在细胞内的相互作用,通过激光共聚焦技术观察二者在HEK293细胞内的免疫荧光亚细胞水平共定位情况。结果：1、经免疫共沉淀正反双向实验证实了实验所构建的载体正确,在细胞内均有表达,分子量大小合适,从而证实了THRSP与LOH12CR1在细胞内存在相互作用；2、经免疫荧光实验及激光共聚焦检测到THRSP主要定位于胞浆中,而LOH12CR1在胞浆、胞核中均有分布,LOH12CR1与THRSP存在亚细胞共定位,且主要共定位于胞浆。结论：本研究证实了THRSP/Spotl4与LOH12CR1在细胞内存在相互作用的关系,目前已知THRSP/Spot14主要生物学功能为脂肪合成所必需的蛋白且在某些肿瘤(特别是乳腺癌)中有高表达,从而提示了LOH12CR1可能从脂代谢方面参与了肥胖和肿瘤(特别是乳腺癌)的发生发展,这些假设我们将在后续的研究中加以验证。