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苹果是我国的主要水果之一,种质资源丰富,但植物在生长过程中,会经受各种比如盐害、干旱、高/低温和氧化胁迫等非生物胁迫,导致环境退化,严重影响了农业生产。逆境条件下,植物会作出应激反应,传递逆境信号,转录因子所调控的相关功能基因的表达产生关键作用,发生生理、生化过程,增强环境适应性。非生物胁迫严重影响到植物的生长进程,而MYB类转录因子在植物响应非生物胁迫起重要作用,目前在拟南芥和烟草研究的比较深入,但在苹果等木本植物的相关研究较少。因此探究利用基因工程技术,对作物进行遗传改良,提高其抗逆性,是保障作物达到高产优质、安全生产的有效途径,拥有广阔的应用前景。本研究以’王林(Orin)’苹果愈伤组织为研究材料,通过克隆获得了苹果基因MdMYB4,并对其进行了生物信息学分析,通过转基因技术获得了过表达MdMYB4王林愈伤组织,利用qRT-PCR技术测MdMYB4以及相关基因MdNHX1、MdSOS1在不同NaCl浓度下的表达水平,经原核诱导得到重组蛋白,所做工作为进一步深入研究苹果基因MdMYB4的功能奠定基础。主要结果如下:(1)获得了苹果抗盐基因MdMYB4(基因序列号:MDP0000230141)的全长cDNA,测序发现其完整的开放阅读框为813bp,编码270个氨基酸,等电点为5.25。(2)MdYB4与其五个同源基因VvMYB13、PbMYB13、AtMYB13、AtMYB14和AtMYB15的氨基酸序列比对发现,这些基因的R2R3结构域在N端序列保守,C端有差异,并且都存在SG2基序(MxFW[F/Y]D);(3)洋葱表皮亚细胞定位结果表明,苹果MdMYB4蛋白作用部位位于细胞核。(4)在梯度NaCl处理下,过表达MdMYB4基因的王林愈伤组织相比野生型王林愈伤组织生长情况更好,表明MdMYB4基因的表达受盐胁迫诱导,转基因结果表明过表达MdMYB4可以提高王林愈伤组织的抗盐性。(5)qRT-PCR结果显示,在不同NaCl浓度处理下,过表达MdMYB4王林愈伤组织中,MdMYB4与MdNHX1基因表达量相一致,且分析MdNHX1启动子的顺式作用元件可知,其启动子含有MYB结合位点。因此推断,R2R3-MYB转录因子MdMYB4能调控MdNHX1的表达。