【摘 要】
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背景和目的基因启动子区高甲基化在肿瘤相关基因的调控和肿瘤的发生中起着重要的作用。人们认识到,肿瘤的发生发展过程中基因CpG岛的甲基化水平逐渐增加,是一个动态过程,所以许
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背景和目的基因启动子区高甲基化在肿瘤相关基因的调控和肿瘤的发生中起着重要的作用。人们认识到,肿瘤的发生发展过程中基因CpG岛的甲基化水平逐渐增加,是一个动态过程,所以许多研究者认识到定量研究肿瘤中基因甲基化的必要性。对于DNA甲基化水平的定量检测,目前尚无一种统一方法。本实验用SYBR Green定量甲基化特异性PCR方法检测了E-cad基因的DNA甲基化水平,并分析E-cad基因在胃癌发生中的作用。材料和方法标本共分两组,胃癌组18例,正常对照组10例。以CpGenomeTM Universal Methylated DNA制作标准品。用SYBR Green荧光定量甲基化特异性PCR,检测E-cad启动子区甲基化水平。并检验此实验的特异性和准确性。结果标准曲线相关系数r=-0.99。特异性检测中,阴性对照无特异的荧光信号,阳性对照均可检测到甲基化E-cad值,检出率为100%,特异性为100%。在E-cad基因的甲基化水平定量检测中,胃癌组甲基化阳性率为55.56%,对照组甲基化阳性率为10.00%,两组间甲基化阳性率比较差异显著,有统计学意义(p<0.05);对测得值取对数,胃癌组均数为4.29±4.12,对照组均数为0.29±0.91,胃癌组比对照组甲基化E-cad水平显著升高,有统计学意义(p<0.05)。年龄组间甲基化E-cad水平无明显差异,无统计学意义(p>0.05)。结论SYBR Green荧光定量甲基化特异性PCR能够定量检测基因启动子区甲基化水平,具有准确性、特异性高的特点。胃癌组E-cad甲基化水平明显升高,对E-cad基因启动子区甲基化水平的定量检测可以作为胃癌诊断和预后监测的一项有价值的检查手段。
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