目的:比较贴壁法和密度梯度离心法分离提取经血源性间充质干细胞;探讨经血源性间充质干细胞对子宫内膜间质细胞的作用,为其临床应用提供依据。方法:1.使用无菌月经杯收集年龄<35岁的健康女性第2-4天的月经血,通过Ficoll密度梯度离心法和贴壁法提取Men SCs,并采用流式细胞术鉴定。2.通过添加生长因子和17-β-戊酸雌二醇构建Men SCs向子宫内膜细胞方向分化的微环境,诱导Men SCs的转化,通过免疫荧光法检测ESCs特异性标记蛋白Vimentin和上皮细胞特异性标记蛋白CK,评估Men SCs的转化能力。3.选取行宫腔镜刮宫的患者,收集子宫内膜组织,通过二次网筛法分离ESCs并培养,采用免疫荧光法进行鉴定。4.间接共培养Men SCs与ESCs,通过CCK-8法评估Men SCs对正常ESCs的增殖作用,Western-blot检测共培养后ESCs胞质内的Vimentin和VEGF的表达量,观察Men SCs培养基培养后对这两种蛋白的表达影响。结果:1.Ficoll密度梯度离心法所提取出的细胞表面标志物的阳性表达率分别为83.88%、98.69%、98.78%、99.80%,贴壁法表面标志物的阳性表达率分别为61.39%、65.15%,99.66%、100.00%。两种方法提取的Men SCs表面HLA-DR、CD34和CD45表达均为阴性;2.Men SCs经生长因子和17-β-戊酸雌二醇诱导后,形态开始发生改变,由短梭形向长梭形变化,形态趋于ESCs的长梭形,呈现抱团式、旋涡式生长。Vimentin和CK表达阳性;3.加入Men SCs培养基培养24 h,48 h,72 h的子宫内膜间质细胞吸光度值,较单独培养的子宫内膜间质细胞明显增高。实验组Vimentin、VEGF蛋白的表达量高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。结论:1.通过Ficoll密度梯度离心法和贴壁法均可以获得较高纯度的Men SCs,且Ficoll密度梯度离心法获得的Men SCs纯度更高。2.在生长因子和17-β-戊酸雌二醇的诱导下,Men SCs可以分化为子宫内膜间质细胞和上皮细胞。3.Men SCs可促进人子宫内膜间质细胞增殖,增强VEGF的表达,改善子宫内膜容受性。