电刺激大鼠小脑顶核对视网膜缺血再灌注损伤中光感受器细胞保护作用

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目的:观察电刺激大鼠小脑顶核(cerebellarfastigialnucleus,CFN)对视网膜缺血再灌注损伤中光感受器细胞的保护作用,对电刺激CFN治疗视网膜缺血再灌注损伤的治疗机制进行探索研究。 方法:SD大鼠随机分为电刺激组、缺血再灌注组和假治疗组。缺血再灌注组为单纯缺血再灌注,不做大鼠电刺激CFN预置电极模型,不进行电刺激;电刺激组,在做电刺激的动物模型后进行缺血再灌注,再灌注第1h用脑循环治疗仪电刺激大鼠CFN,刺激时间为1h;假治疗组在做电刺激的动物模型后进行缺血再灌注,只做大鼠CFN预置电极模型,不电刺激。缺血时间为0.5、1、2、3、4、5、6h,再灌注时间均为6h,电刺激均在再灌注的第1h进行。用彗星试验检测DNA损伤程度;免疫组织化学检测Caspase—3的表达,了解细胞凋亡情况。 结果:电刺激组各时间点与缺血再灌注组、假治疗组对应的各时间点Olive尾矩相比较,除0h、0.5h时间点无显著差异(P>0.05)外,其余时间点比较均有显著差异(P<0.05);缺血再灌注组各时间点与假治疗组相对应的各时间点Olive尾矩比较,无显著性差异(P>0.05)。组内的各时间点Olive尾矩相比较,除3h、4h组间无显著性差异外(P>0.05),余各组间均出现显著性差异(P<0.05)。彗星实验中,Olive尾矩越大,表明细胞损伤越严重;反之,损伤越轻。总体上,组内随着缺血时间的增加,Olive尾矩逐渐增大;但在0.5hOlive尾矩与0h比较有减小。 Caspase-3的表达,除0h为阴性表达外,余均在光感受细胞胞浆内呈阳性表达。光密度分析显示,各组间比较0h无显著性差异(P>0.05);缺血再灌注组与电刺激组各对应时间点相比较,各组间均出现显著性差异(P<0.05);假治疗组与电刺激组各对应时间点,各组间均出现显著性差异(P<0.05);缺血再灌注组与假治疗组各对应时间点,均无显著性差异(P>0.05);在6h电刺激组光密度大于缺血再灌注组和假治疗组。总体上,Caspase-3光密度值,在0-3h是逐渐增大;3-4h光密度值变化不大;4-6h光密度值逐渐降低。 结论:电刺激大鼠CFN对视网膜缺血再灌注损伤中光感受器细胞DNA损伤具有保护作用;缺血2h以内再灌注后立即进行电刺激CFN为最佳治疗时间;缺血4h前再灌注后立即进行电刺激CFN对于DNA损伤的保护有效。
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