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研究背景神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)是指由直接影响躯体感觉功能的病损或相关的疾病引起的疼痛,其病程反复,难以治愈,是一个全球性的健康问题,涉及全球6.9%～10%的人口。腰椎间盘突出导致的根性神经痛是最常见的神经病理性疼痛之一,通常伴有超敏和痛觉敏感症状,中枢敏化是NP的重要发病机制。大鼠背根神经节持续受压模型(chronic compression of the dorsal root ganglion,CCD)能较好地模拟神经受压的病理改变,具有操作简单、成功率高的优点,能够触发稳定的自发性和诱发性疼痛症状。瞬时感受器电位离子通道中的香草素受体亚家族4(transient receptor potentialvanilloid 4,TPRV4)属于非选择性的阳离子通道的一种,广泛分布于神经系统中,可在肺、肾、睾丸、皮肤、脊髓等多种组织里发现,多种理化性质(如低渗、机械变形、高温、炎症介质、细胞内外Ca2+浓度变化)可激活该通道,参与调节神经细胞的多种生物学功能,包括信号传导、细胞生长与调控等。低能量激光治疗(low level laser therapy,LLLT)现已广泛应用于物理医学和康复医学等临床领域中,对疼痛治疗效果良好,特别是在治疗肌肉骨骼疼痛方面效果明显,同时低能量激光对神经病理性疼痛亦有一定的疗效。低能量激光治疗具有加速损伤组织的愈合、减少局部炎症和水肿、恢复局部血供和抑制局部疼痛的作用。研究目的观察低能量激光对CCD大鼠痛觉敏感的影响,及脊髓背角内TRPV4表达与分布的变化,初步探讨低能量激光对CCD大鼠的镇痛作用机制。研究方法1.大鼠背根神经节持续受压模型制作选取健康雄性Wistar大鼠36只(每只体重180-200g,均购自山东大学动物实验中心),分为空白组、CCD组、激光组各12只。CCD组与激光组大鼠L4/L5椎间孔内插入直径为0.63mm的L型钢棒。空白组术中不插入钢棒,余手术步骤各组均相同。2.低能量激光照射治疗激光组在CCD后第4天经皮肤给予L4/L5脊髓节段处810nm低能量激光治疗,输出功率150mw,10min/次,连续治疗7次。空白组与CCD组未给予激光治疗,三组饲养条件均一致。3.行为学测定-机械刺激缩爪反应阈值与热缩爪潜伏期测定于术前,术后第4、7、11天,分别测量各组大鼠机械刺激缩爪反应阈值和热缩爪潜伏期,比较各组大鼠机械痛阈和热痛阈的变化情况。4.脊髓背角TRPV4蛋白表达变化及阳性细胞分布检测术后11天,行为学检测之后将大鼠处死取材,利用western blot检测各组TRPV4在脊髓背角中蛋白表达的变化,利用免疫荧光技术检测各组TRPV4阳性细胞分布。结果1.大鼠CCD术后机械痛与热痛阈变化与空白组相比,CCD组大鼠术后第4天、7天、11天,机械痛阈和热痛阈均降低(P<0.01)。与CCD组相比,激光组术后第7天、11天,机械痛阈和热痛阈显著增高(P<0.01)。2.脊髓背角TRPV4蛋白表达变化及阳性细胞分布术后11天,与空白组相比较,CCD组大鼠脊髓背角中TRPV4表达显著上调(P<0.01),TRPV4阳性细胞数目升高(P<0.01);激光组脊髓背角TRPV4的蛋白表达较CCD组显著下调(P<0.01),TRPV4阳性细胞数目降低(P<0.01)。结论低能量激光可能通过影响脊髓背角中TRPV4蛋白表达缓解CCD后所致的痛觉敏感。