白桦树皮提取物肝保护及降血脂作用研究

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目的:1.建立高效液相色谱法测定白桦树皮中白桦酯醇和白桦酯酸含量的方法:2.探讨白桦树皮提取物对小鼠爆发性肝损伤的保护作用;3.通过建立高脂血症小鼠模型研究白桦树皮提取物(BHSP)的降血脂和抗氧化作用。方法:1.色谱柱:Shim-pack VP-ODS(150L×4.6),流动相为甲醇—水(86:14),检测波长210 nm,流速:1.0 ml/min,柱温30℃;2.采用D-氨基半乳糖(D-Galactosamine)和内毒素(Lipopolysaccharide),造小鼠爆发性肝损伤模型,观察白桦树皮提取物对爆发性肝损伤小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST);同时观察白桦树皮提取物对急性肝损伤小鼠生存率的影响;肝组织中组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)等水平来进行评价,病理组织切片和免疫组化来观察白桦树皮提取物对肝损伤的保护作用;3.先用不同剂量的白桦树皮提取物(100 mg/kg,200 mg/kg和300 mg/kg)预防给药7天,末次给药2 h后采用腹腔注射75%蛋黄乳液制作小鼠高脂血症模型,造模12 h后测定不同剂量的白桦树皮提取物对75%蛋黄乳液诱导的小鼠血脂水平、血清生化指标和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量的影响。结果:1.白桦酯醇在0.54~3.78μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),白桦酯酸在0.045~0.315μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9995),平均回收率为白桦酯醇104.5%,白桦酯酸99.9%,白桦酯醇RSD=0.94%,白桦酯酸RSD=1.03%;2.白桦树皮提取物明显降低因D-氨基半乳糖和内毒素合用导致中毒小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活力升高;同时可提高肝损伤小鼠的生存率;明显抑制了肝组织中MDA的升高和GSH的降低,HIF-1α和Caspase阳性表达率明显降低,减少了肝损伤程度;3.白桦树皮提取物能够显著降低小鼠血清中TC、TG、LDL-C浓度和ALT、AST活性,显著升高HDL-C浓度;显著降低肝脏中MDA含量,提高肝脏中SOD和GSH-Px活性。结论:1.结果表明此方法操作简单,准确,灵敏度高,重现性好,可以同时对白桦树皮提取物中的白桦酯醇和白桦酯酸的含量进行测定;2.白桦树皮提取物对D-氨基半乳糖和内毒素所致小鼠爆发性肝衰竭具有良好的保护作用;3.白桦树皮提取物具有明显的降血脂和抗氧化作用。
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