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鸭疫里氏杆菌病是由鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)引起的的一种主要侵害雏鸭、雏火鸡等多种禽类的急性或慢性传染病。该病的发病率和死亡率较高,已成为目前危害世界各国养鸭业最为严重的传染病之一,给养鸭业造成了巨大的经济损失。RA现已发现21个血清型,各血清型之间很少有交叉保护性;对于已感染RA的鸭群,经常用药易产生耐药菌株。因此,建立快速检测RA的方法、了解RA血清型的变化趋势以及开展RA疫苗方面的研究,对于该病的有效防制是十分必要的。本研究根据RA 16S rRNA基因序列设计一对RA特异性引物,成功地建立了检测RA的PCR方法,特异性强,同时该PCR方法能检出20 pg的RA DNA,灵敏度高,这为RA的检测提供了一种快速、敏感、特异性强的检测方法。应用该PCR方法对病料组织直接进行RA检测,脑组织为首选检测对象,具有良好的实际应用意义。利用常规方法和建立的PCR方法对安徽省滁州市、六安市、安庆市、合肥市、巢湖市和蚌埠市六个地区108份病/死鸭进行RA检测,六个地区均检测出RA,阳性检出率为24.07%(26/108),其中滁洲市RA分离株占总分离株的57.69%(15/26),显示安徽地区RA的感染较为普遍,滁洲地区感染情况严重。26株RA分离株中20株为血清1型,占总分离株的76.92%,6株未定型,表明安徽省目前至少存在两种不同的血清型,而2000年以前的分离株均属血清1型,说明安徽省RA流行菌株的血清型存在动态变化,血清型呈现多极化的趋势。对安徽省RA分离株的16S rRNA基因和cam基因进行扩增和序列测定,并与国内外参考菌株进行同源性比较,结果表明不同血清型、同一血清型的不同菌株之间及不同地区的菌株之间16S rRNA基因序列无明显差异,RA 16S rRNA基因核苷酸序列差异的距离与地理分布、菌株来源无一定的相关性;不同毒力株之间cam基因并无明显差异,根据cam基因无法判断不同菌株的毒力强弱。通过动物回归试验,测定8株RA分离株的毒力,其中CZ9和AQ2为弱毒菌株,CZ1、AQ1、LA4为中等毒力菌株,CZ2、CZ12、HF1为强毒菌株。将CZ9和AQ2免疫鸭,CZ9对CZ12和HF1攻击的保护率分别为60%和80%,比AQ2的免疫原性好,故将其作为弱毒疫苗株的候选株,进一步测定CZ9的最佳免疫剂量为8.0×10~8CFU/0.1mL,从而为RA弱毒疫苗的研制提供了一定的基础数据。