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MicroRNAs(miRNA)作为脂肪内稳态的重要调节因子,在脂肪生成中发挥着重要的作用。体外研究表明miR-130a可通过直接靶向PPARγ调控脂肪代谢作用,但其在活体水平上的对脂肪代谢的影响尚未报道。本研究采用Crisper/cas9技术制备miR-130a敲除小鼠,探讨了miR-130a缺失后动物对高能量的利用和代谢的分子机制。试验分为4组,分别用常规饲料(5 kcal%脂质)和高脂饲料(60 kcal%脂质)饲喂野生型小鼠和mi R-130a敲除小鼠,饲喂期间对小鼠进行葡萄糖耐受试验和胰岛素耐受试验。饲喂9-14周后,对小鼠的脂肪组织和肝脏组织进行形态学分析和分子检测,试验结果如下:1.测序结果130KO小鼠的miR-130a基因被成功敲除,qRT-PCR结果表明130KO小鼠的miR-130a表达量显著下降(P<0.05)。2.普通饲料饲养条件下,野生型(WT)小鼠和miR-130a敲除小鼠(130KO)的体重并无差异,高脂饲料饲养条件下130KO小鼠体重显著高于WT小鼠(P<0.05);解剖小鼠发现,130KO小鼠的皮下脂肪和肝脏都显著重于WT小鼠(P<0.05);石蜡切片结果显示130KO小鼠的脂肪细胞较大,油红O染色显示130KO小鼠肝脏中的甘油三酯相比WT小鼠显著增多。3.荧光定量PCR结果显示,无论是普通饲料还是高脂饲料饲养下,130KO小鼠的三种脂肪生成标记基因PPARγ、CEBP/α和LPL的表达量均有显著地增加(P<0.05),高脂饲养下130KO小鼠皮下脂肪中IL6地表达量显著高于WT小鼠。Western blot结果显示,在高脂诱导下130KO小鼠的PPARγ的表达量增加(P<0.01)。4.葡萄糖和胰岛素耐受试验结果显示,在常规饲料和高脂饲料的两种饲喂条件下,130KO小鼠相比于WT小鼠均表现出葡萄糖代谢能力下降(P<0.05)。而在高脂诱导下,130KO小鼠出现明显的胰岛素拮抗现象(P<0.05)。综上所述,本研究成功建立了miR-130a基因缺失小鼠模型,发现缺失miR-130a小鼠更容易出现肥胖,同时miR-130a基因敲除小鼠葡萄糖清除能力降低并且出现胰岛素拮抗。