初步研究色氨酸作为共振能量转移(FRET)的供体,吖啶衍生物作为荧光配体中的接受体,通过非辐射的共振能量转移造成供体荧光猝灭和接受体荧光发射,从而进行均相亲和分析的可能性;此技术可用于非竞争结合检测蛋白含量、竞争结合测定配体含量或配体亲和力。用二苯胺、乙酸等以Bernthsen法合成系列9-甲基吖啶衍生物,但是这类衍生物稳定性很低。用邻氯苯甲酸、苯胺等通过取代、缩合合成了吖啶、吖啶酮、9-氯吖啶等一系列吖啶衍生物,通过与其他基团的连接获得蛋白的荧光配体作为FRET探针;其中9-氨基吖啶衍生物和吖啶-9-羧酸衍生物具有较好稳定性。用9-氨基吖啶和月桂酸生成酰胺,尝试作为白蛋白的FRET探针,其对人血清白蛋白中色氨酸的荧光有一定猝灭作用。用吖啶-9-羧酸和生物素乙二胺生成酰胺作为链亲和素的FRET探针,能够有效猝灭链亲和素荧光;但吖啶荧光对微环境敏感,其在疏水环境的量子产率显著降低,与蛋白形成复合物后探针中吖啶特征发射无明显增强。据此FRET探针对链亲和素荧光的猝灭,有望通过竞争结合测定非荧光生物素衍生物亲和力。利用吖啶荧光团和蛋白质形成复合物前后自身荧光信号的变化,也有望通过竞争结合测定蛋白配体的亲和力。