猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起,主要危害初生仔猪的急性肠道疾病,本病在全球流行,给全球养猪业造成了巨大经济损失。接种疫苗是目前该病临床防治的主要手段,但由于病毒在长期流行过程中发生了变异,出现已免疫猪群仍发生感染,既有疫苗对新型的病毒失去保护力等现象。因此,研究该病的流行变异情况,开发一种能够快速检测抗体水平,评估免疫效果的方法具有很重要的现实意义。本研究采集了广东省部分地区的PEDV毒株,对其M基因进行克隆测序以及遗传进化分析,并以PEDV全病毒作为包被抗原,初步建立了检测PEDV抗体的竞争ELISA方法。具体研究内容如下:1、PEDV M基因遗传进化分析为分析2015年～2018年广东省猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行株的遗传变异情况,本实验采集了22株广东省不同地区的PEDV流行株,通过对M基因进行克隆和测序,将测序结果进行同源性分析并构建系统进化树。结果显示:22株PEDV流行株间核苷酸序列同源性及与华南地区参考株M基因核苷酸序列同源性较高,与国内较早报道的分离株CH/S和经典毒株CV777同源性较低。遗传进化分析结果表明:广东省当前流行的PEDV基因变异形成独特的进化分支,成为该地区的优势病毒株。2、PEDV抗体竞争ELISA检测方法的建立实验使用PEDV全病毒液作为包被抗原,实验室制备纯化的抗PEDV卵黄抗体作为竞争抗体,初步建立了一种检测PEDV抗体的竞争ELISA方法,通过条件优化,确定了实验方法及各步骤的最佳条件,根据临界值标准,经检测计算,确认阴性血清临界值=X+2SD=32.5%,阳性血清临界值=X+3SD=42.0%,介于两者之间为可疑;试验批内和批间重复变异系数在1.1%-8.7%之间,均小于10%,证明该方法重复性较好,该方法的建立为进一步研制PEDV的ELISA抗体检测试剂盒奠定了良好的基础。