强力霉素对退变腰椎间盘中MMP-3表达水平的调控研究

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目的:研究强力霉素对退变腰椎间盘中基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)表达水平的调控作用,为腰椎间盘退变的病人寻找新型药物治疗。方法:1.按随机数字表随机将40只大鼠分为对照组和实验组各20只,制备动物模型,8周后实验组动物每日皮下注射强力霉素25mg,分早晚两次注射,对照组动物每日皮下注射等体积的生理盐水,分早晚两次注射。2周后取腰椎间盘组织,一部分放置10%中性福尔马林固定,另一部分存放在液氮中;2.免疫组织化学检测:取福尔马林固定好的样本应用免疫组织化学SP法检测腰椎间盘组织中MMP一3的表达,阳性表达为为棕黄色,主要存在于细胞浆内,用Image-Pro Plus6.3软件测量实验组和对照组的平均光密度值;3.蛋白印迹实验(Western—bloting)检测:用液氮中保存的样品采用抽提椎间盘髓核的蛋白,转膜后X线显影,再在培清JS-780全自动凝胶图像分析系统成像,测平均相对含量。结果:免疫组织化学检测中,实验组大鼠椎间盘组织MMP~3表达弱阳性,对照组表达阳性,测量实验组和对照组的平均光密度值,实验组MMP-3表达较对照组MMP-3表达低(P<0.01),蛋白印迹实验(Western—bloting)检测中,测量成像后MMP-3图像和相应的Actin的比值,将两者的比值作为MMP-3的相对含量,结果实验组MMP-3相对含量较对照组MMP-3相对含量低(P<0.01)。结论:⒈SD大鼠腰椎退变模型成功建立。2.强力霉素皮下注射能引起注射部位局部皮肤溃疡。3.新型MMPs抑制剂强力霉素能降低退变腰椎间盘MMP-3表达水平。
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