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目的 通过检测人型支原体(Mycoplasma hominis,Mh)临床株对5种大环内酯类抗生素的敏感性,研究耐交沙霉素Mh临床株23S rRNA Ⅱ区和Ⅴ区核苷酸突变与对大环内酯类抗生素耐药性的关系,为临床治疗提供实验依据,以了解Mh对大环内酯类抗生素的耐药机制。 方法 应用微量肉汤稀释法检测106株Mh对5种大环内酯类抗生素的敏感性,以MIC值大于或等于标准敏感株的4倍为参考标准,从中筛选临床耐药株。按照文献设计并合成耐交沙霉素Mh临床株23S rRNA Ⅱ区和Ⅴ区DNA序列的引物,利用多聚酶链反应(PCR)扩增其DNA片段并测序。通过Blast软件进行分析,将其与Mh标准敏感株PG21核苷酸序列进行比较,分析核苷酸突变及其与大环内酯类抗生素耐药性的相关性。 结果 在106株Mh临床株中,对5种大环内酯类抗生素的敏感性以交沙霉素抗Mh活性最强,MIC50为0.125mg/L,MIC90均为0.5mg/L,其次为罗红霉素、克拉霉素、阿奇霉素MIC50分别为4mg/L、32mg/L、64mg/L,MIC90分别为32mg/L、128mg/L、512mg/L,红霉素的抗Mh活性最差,其MIC50和MIC90分别达到64mg/L和512mg/L。抑制100%的Mh临床株交沙霉素只需4mg/L,而罗红霉素需64mg/L、克拉霉素、阿奇霉素、红霉素需512mg/L。 利用引物经PCR扩增耐交沙霉素Mh临床株的23S rRNA Ⅱ区和Ⅴ区,测序后Blast软件分析得出:23S rRNAV区2059位发生A→G突变,2610发生C→T突变,2670和2675位发生G→T突变,2687位发生G→A突变。耐交沙霉素Mh临床株