Ang(1-7)对大鼠心肺复苏后心肌损伤的保护作用及机制研究

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目的:探讨Ang(1-7)在心脏骤停-心肺复苏后心肌损伤中的作用及其可能机制,为治疗复苏后心肌损伤提供新的治疗方向。方法:由室颤法(VF)诱发的心脏骤停-心肺复苏模型,根据大鼠复苏结局被随机分为假手术组(sham,n=18),常规复苏组(control,n=18)、MasR激动剂Ang(1-7)组(n=18)及MasR拮抗剂A779组(n=18),动态监测各组大鼠血流动力学及心功能指标HR、MAP、LVSP、LVEDP,观察至复苏后2h、4h、6h时留取心肌、血清标本,采用HE染色法检测心肌病理性损伤情况,比色法检测血清cTnTI、BNP表达水平,ELISA法检测血清AngⅡ、Ang(1-7)及心肌组织SOD、MDA的表达,RT-PCR法检测心肌组织AT1、AT2、Mas受体、PI3K、Akt mRNA表达水平,Western Blot法检测心肌组织AT1、AT2、Mas受体、PI3K、pAkt及caspase-3蛋白的表达变化。结果:1.在大鼠心脏骤停-心肺复苏模型中Ang(1-7)对复苏后心肌功能影响:与sham组比较,control组、Ang(1-7)组及A779组大鼠心肌出现病理性损伤,复苏后心泵功能指标LVSP减低,LVEDP升高,心衰指标BNP升高,心肌损伤指标cTnT升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);与control组比较,Ang(1-7)组大鼠LVSP指标降低,LVEDP指标升高,BNP及cTnT降低,A779组大鼠心功能指标LVSP降低,LVEDP升高,血清BNP、cTnT升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。2.外源性Ang(1-7)对复苏后心肌RAS的影响:与sham组比较,其余三组血清AngⅡ升高,Ang(1-7)组大鼠Ang(1-7)表达升高;control组与A779组大鼠AT1R mRNA及蛋白表达高而MasR mRNA及蛋白表达降低,Ang(1-7)组大鼠MasR mRNA及蛋白表达高而AT1R mRNA及蛋白表达低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与control组比较,Ang(1-7)组大鼠血清中AngⅡ表达降低,Ang(1-7)表达升高;A779组大鼠复苏后AngⅡ升高,Ang(1-7)在复苏后降低;Ang(1-7)组复苏后AT1R mRNA及蛋白表达减少而MasR mRNA及蛋白表达升高;复苏后A779组的AT1受体mRNA及蛋白表达增高而Mas受体mRNA及蛋白表达降低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。3.外源性Ang(1-7)通过调节PI3K/Akt通路,减轻心肌损伤及心衰程度,降低凋亡:与sham组比较,其余三组大鼠PI3K、Akt mRNA及蛋白表达升高;control组、Ang(1-7)组大鼠SOD表达高而A779组表达低,control组、A779组MDA表达高而Ang(1-7)组低;control组、A779组大鼠caspase-3的表达均升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与control组比较,Ang(1-7)组大鼠心肌的PI3K、Akt mRNA及蛋白表达均升高;A779组大鼠复苏后PI3K、Akt m RNA及蛋白表达均降低。Ang(1-7)组大鼠心肌中SOD表达高而MDA表达低,A779组大鼠心肌中SOD降低而MDA表达升高;Ang(1-7)组caspase-3表达低,A779组大鼠心肌caspase-3表达高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Ang(1-7)在大鼠心肺复苏后,可以改善心脏收缩与舒张功能,稍减少复苏后心肌病理性损伤,减轻心肺复苏后心肌组织的损伤及心力衰竭的程度;Ang(1-7)可能通过上调MasR表达,激活PI3K/Akt信号通路,减轻心肌氧化应激及凋亡水平,改善心肺复苏后心肌损害。
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