马铃薯Y病毒属(Potyvirus)是最大的植物病毒属,该属病毒给作物生产造成严重的经济损失。在目前已经报道的1000多种植物病毒中约有30%的病毒属于马铃薯Y病毒属。PIPO是近年来研究发现的通过移码编码的马铃薯Y病毒属病毒新蛋白。这一移码蛋白被认为以P3N-PIPO的形式存在,并在马铃薯Y病毒属病毒的细胞间移动中发挥作用。为了研究烟草脉带花叶病毒(Tobacco vein banding mosaic virus, TVBMV) PIPO的存在形式,我们首先对TVBMV的侵染性cDNA克隆pCamTVBMV-GFP进行了改造,获得了P3N端带有组氨酸标签的质粒pCamTVBMV-6HIS-P3N-GFP。该质粒与pCamTVBMV-GFP引起的症状一致。我们利用组氨酸特异性抗体通过Western blot分别在pCamTVBMV-6HIS-P3N-GFP侵染的本氏烟和普通烟中检测到了分子量大小为40kDa和24kDa的蛋白条带,大小与TVBMV P3和P3N-PIPO一致,这表明TVBMV的PIPO与P3N末端融合表达产生P3N-PIPO蛋白。马铃薯Y病毒属病毒与马铃薯X病毒(Potato virus X, PVX)复合侵染能引起协生,协生的两种病毒复合侵染能引起比单独侵染更严重的症状从而加重对植物造成的损害。研究发现马铃薯Y病毒属病毒的RNA沉默抑制子HC-Pro参与了马铃薯Y病毒属病毒与PVX的协生。我们将TVBMV和马铃薯Y病毒(Potato virus Y, PVY)的P3N-PIPO分别克隆到PVX侵染性克隆pGR106,获得重组质粒pGRl06-P3N-PIPOTVBMV和PGR106-P3N-PIPOPVY。接种pGRl06-P3N-PIPOTVBMV和pGR106-P3N-PIPOPVY的本氏烟的上部叶片出现严重花叶症状,而接种pGR106的本氏烟的上部叶片只出现轻微明脉症状。ELISA和Western blot结果表明表达P3N-PIPO的PVX病毒浓度以及外壳蛋白的表达量与PVX相比无明显变化。进一步研究发现P3N-PIPO的P3N区域而不是PIPO区域使PVX在本氏烟上产生严重花叶。Northern blot分析表明PIPO区域、P3N区域以及完整P3N-PIPO蛋白都不能使PVX在本氏烟系统叶片中的基因组和亚基因组的RNA积累水平增加。瞬时共表达P3N-PIPO、GFP和hpGFP的本氏烟叶片无绿色荧光,而共表达HC-Pro、GFP和hpGFP的本氏烟叶片则表现出强烈的绿色荧光,说明P3N-PIPO不能抑制RNA沉默。这些结果表明,马铃薯Y病毒属病毒的P3N-PIPO通过一种不同于RNA沉默抑制的特殊机制参与了马铃薯Y病毒属病毒与PVX的协生。TVBMV主要侵染烟草、马铃薯、茄子等茄科作物,近年来在我国的发生呈逐年上升的趋势。我们从山东潍坊和临沂地区的番茄上检测到了TVBMV。室内接种实验表明接种pCamTVBMV-GFP后第12天,32个待试番茄品种中的20个品种表现出轻微花叶症状,并在紫外灯下表现出GFP绿色荧光,表明TVBMV未来可能会对番茄生产造成潜在危害。