论文部分内容阅读
目的：探讨三七总皂甙(PNS)对兔背驮式肝移植术后供肝胆管缺血-再灌注损伤的预防作用及其机制。方法：建立兔同种异体原位背驮式肝移植模型36例，共81只动物随机分为3组。实施方案针对PNS组和NS组供体。(1)生理盐水预处理对照组(NS组)：术前三天开始，每天经供体耳缘静脉注射NS 5ml，1次／天，共3天；(2)三七总皂甙预处理组(PNS组)：术前三天开始，每天经供体耳缘静脉注射PNS(60mg／kg)+NS共5ml，1次／天，共3天；(3)假手术组(SO组)：术前不做任何处理，手术时打开腹腔，游离肝脏，结扎左膈下静脉、右肾上腺静脉。NS组和PNS组分别于供肝胆管再灌注2小时、6小时、24小时处死各组动物，SO组于术后同样时点处死动物，获取供肝胆管组织作为标本。观察胆管组织病理变化；透射电镜观察胆管组织超微结构的变化情况；对线粒体进行图象分析；流式细胞术检测各组胆管组织细胞的凋亡及坏死情况。结果：SO组各时点胆管组织细胞中的线粒体基本正常，没有明显肿胀。NS组供肝胆管再灌注2h、6h和PNS组供肝胆管再灌注2h时胆管组织细胞线粒体最大直径均显著大于SO组(P＜0.01)，PNS组供肝胆管再灌注6h与NS组供肝胆管再灌注24h线粒体最大直径均大于SO组(P＜0.05)，PNS组供肝胆管再灌注2h、6h、24h各时点线粒体的最大直径均小于NS组(P＜0.05)；PNS组和NS组供肝胆管再灌注2h线粒体面积大于SO组(P＜0.05)，NS组供肝胆管再灌注6h、24h线粒体面积显著大于SO组(P＜0.01)，PNS组供肝胆管再灌注6h、24h线粒体面积小于NS组(P＜0.05)，PNS组和NS组均于供肝胆管再灌注6h左右线粒体直径和面积达最大；SO组各时点胆管细胞的凋亡率和坏死率极低；NS组及PNS组供肝胆管再灌注2h胆管细胞凋亡率大于SO组(P＜0.05)，两组6h、24h凋亡率显著大于SO组(P＜0.01)，PNS组再灌注2h、6h凋亡率小于NS组(P＜0.05)，24h凋亡率显著小于NS组(P＜0.01)；PNS组和NS组供肝胆管再灌注2h、6h、24h各时点胆管细胞坏死率显著大于SO组(P＜0.01)，PNS组供肝胆管再灌注6h胆管细胞坏死率显著小于NS组(P＜0.01)，术后24h胆管细胞坏死率小于NS组(P＜0.05)；PNS组和NS组供肝胆管再灌注2h、6h、24h各时点胆管细胞总死亡率均显著大于SO组(P＜0.01)，PNS组供肝胆管再灌注2h、6h、24h各时点胆管细胞总死亡率显著小于NS组(P＜0.01)。PNS组供肝胆管再灌注24h胆管组织光镜和电镜表现基本接近正常。结论：PNS可能通过抗炎、维持钙内环境稳定、清除氧自由基等机制有效保护细胞线粒体的形态和功能，降低细胞死亡率，进而发挥对肝移植供肝胆管缺血-再灌注损伤的保护作用。